乙酰羟酸合成酶同工酶基因ilvBNilvGM和ilvIH的表达及对除草剂抗.PDF

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, July 25; 25(7): 1007-1013 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 环境生物技术 ilvBNilvGM ilvIH 沈晶晶, 李永丰, 黄星, 俞欣妍, 何健, 李顺鹏 , 210095 : 乙酰羟酸合成酶(AHAS)是磺酰脲类和咪唑啉酮类等AHAS 抑制剂类除草剂的作用靶标。获得抗此类除草剂的 AHAS 突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值。本研究从抗甲磺隆菌株Klebsiella sp. HR11 和甲磺隆敏感菌株 Klebsiella pneumoniae MGH 78578 中分别克隆到AHAS 三种同工酶基因ilvBN 、ilvGM 和ilvIH 。抗性菌株和敏感菌株 AHAS 三种同工酶基因在氨基酸水平上差异位点主要集中在ilvBN 和ilvGM 的大亚基上。将2 株菌的 ilvBN 、ilvGM 和 ilvIH 分别构建到表达载体 pET29a(+) 中, 在 Escherichia coli BL21(DE3) 中进行表达, 测得只有含菌株 HR11 ilvBN 和 ilvGM 的转化子细胞破碎液AHAS 对各类 AHAS 抑制剂类除草剂具有较强的抗性, 而含菌株HR11 ilvIH 和菌株MGH 78578 ilvBN 、ilvGM 和ilvIH 的转化子细胞破碎液AHAS 对各类AHAS 抑制剂类除草剂敏感。 : AHAS 抑制剂类除草剂, 乙酰羟酸合酶同工酶, ilvBN, ilvGM, ilvIH, 除草剂抗性 Expression of acetohydroxyacid synthase isozyme genes ilvBN, ilvGM, ilvIH and their resistance to AHAS-inhibitor herbicides Jingjing Shen, Yongfeng Li, Xing Huang, Xinyan Yu, Jian He, and Shunpeng Li Key Laboratory of Microbiological Engineering of Agricultural Environment , Ministry of Agriculture , Microbiology Department , College of Life Science, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China Abstract: Acetohydroxyacid synthase (AHAS) catalyses the first reaction in the pathway for synthesis of the branched-chain amino acids. AHAS is the target for sulfonylurea, imidazolinone and other AHAS-inhibitor herbicides. Herbicides-resistant AHAS genes have potent