残次龙须菜多糖及其降解物降血糖作用的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

摘要 龙须菜是粤东沿海大规模养殖的主要经济海藻,资源丰富。残次龙须菜是指采收时因 处理不当而导致变色甚至出胶的龙须菜，目前尚未利用而被废弃，造成资源浪费并污染 环境。研究表明龙须菜多糖具有许多生理活性，分子量对多糖生物活性有重大影响。本 文对残次龙须菜多糖提取条件进行优化，分析比较多糖组成结构的变化，并对多糖进行 化学降解，研究多糖抗氧化、降血糖等生理活性与分子量的关系。本论文首次开展对残 次龙须菜及其多糖的应用基础研究。 （1）采用正交实验设计的方法对残次龙须菜多糖的提取工艺进行了优化，得到的最 佳提取工艺条件为：液料比 1:80，提取温度为 90℃，提取时间 5h 时，在此条件下多糖 提取得率为 25.9%。 （2）对提取的残次龙须菜多糖化学分析结果显示，该多糖平均分子量为 12 万 Da， 是正品龙须菜多糖分子量的两倍，3,6-内醚半乳糖的含量为 59.2%，略高于正品龙须菜， 硫酸基含量为 8.26%，与正品龙须菜相近，残次龙须菜多糖的红外图谱与正品龙须菜多 糖基本一致。 （3）采用 Vc 和 H2O2 反应体系产生羟自由基（·OH）对高分子量残次龙须菜多糖 进行降解。在该反应体系中多糖的降解在 2h 内基本完成，降解剂浓度为 3、5、7、9mmol/L 得到的 4 个降解物的平均分子量分别为 57016、46238、18836 和 14289Da；降解后硫酸 基含量基本不变；3,6-内醚半乳糖含量则呈现随降解物分子量的降低而减少的趋势；降 解物红外光谱图与原料多糖的红外光谱图基本一致，表明多糖降解后，其主体结构和关 键的活性基团没有改变。 （4）体外抗氧化实验表明不同分子量多糖均有一定程度的抗氧化能力，其中分子量 在 5～10 万 Da 之间抗氧化能力最强，当分子量高于 10 万 Da 或小于 5 万 Da 时，其抗氧 化能力均会降低。 （5）探讨不同分子量多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，结果表明，龙须菜多糖能 够有效的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，其中分子量在 5～10 万 Da 之间的降解产物抑制能 力最强。提示残次龙须菜多糖降解物可以用来开发降低餐后血糖水平的保健品或药物。 （ 6 ） 采 用 四 氧 嘧 啶 诱 导 小 鼠 糖 尿 病 模 型 进 行 降 血 糖 作 用 试 验 ， 灌 胃 给 予 200mg/kg.bw 剂量的不同分子量多糖，糖尿病小鼠的血糖浓度显著降低(p0.05)；血清 I TC、TG 和 LDL 含量均显著降低(p0.05)，血清 HDL 含量明显升高(p0.05)；肝脏和肾 脏组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性明显增强(p0.05)，MDA 含量明显降低(p0.05)； HE 染色小鼠组织（胰脏，肝脏和肾脏），结果显示多糖降解物可修复糖尿病小鼠损伤的 胰脏，肝脏和肾脏。由此可知，残次龙须菜多糖降解物不仅能降低糖尿病小鼠血糖水平， 而且还能调节血脂紊乱，提高肝肾抗氧化能力，改善肝、肾等组织形态异常，对糖尿病 小鼠组织器官损伤具有一定的保护作用。根据实验结果推测多糖可能是通过清除体内自 由基来达到修复组织器官功能，从而实现其降血糖作用。 关键词：残次龙须菜，多糖，降解物，抗氧化，α-葡萄糖苷酶，降血糖作用 II 汕头大学 汕头大学硕士学位论文 Abstract PAGE III PAGE III Abstract Gracilaria lemaneiformis is the main economic seaweeds in the eastern Guangdong , rich in resources. Defective Gracilaria lemaneiformis is caused due to improper handling when the asparagus harvest, has not yet been abandoned, resulting in waste of resources and environmental pollution. In this paper, defective Gracilaria lemaneiformis polysaccharide（DGLP）was degraded by free radical from ascorbic acid and hydrogen peroxide in combination to discuss the effect of polysaccharide molecular weigh t on the hypoglycemic,then the hypoglycemic activity of DGLP and its degraded products was ex