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水溶性维生素分析的方法的研究进展 　　摘要：水溶性维生素是人体必需营养元素，摄入过量或缺乏都将导致各种疾病。介绍几种常用的水溶性维生素分析方法，并对目前应用较多的先进技术方法的研究成果进行归纳总结，以期为维生素强化食品的监测提供理论与技术支持。 　　关键词：水溶性维生素；分析方法；研究进展 　　中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2016）08-0062-04 　　维生素是人体生长发育的重要营养元素之一，参与人体重要的生理代谢过程。由于其不能由人体合成，所以需要从富含维生素的食品中补给。维生素包括水溶性维生素和脂溶性维生素，其中水溶性维生素包括维生素C和维生素B族。目前很多食品中都会添加水溶性维生素，但其是否符合要求还有待进一步检测验证。因此，加大对水溶性维生素检测技术的研究，对于人们科学摄入水溶性维生素具有一定的指导意义，同时对于科学控制维生素在食品中的添加量也具有重要意义。水溶性维生素的检测技术可以分为两类：微生物分析法和化学分析法，其中化学分析法主要包括分光光度计法、漫反射FI-TR法、高效毛细管电泳法、高效液相法、液―质联用法。本课题对我国目前水溶性维生素的研究现状进行综述，并对各方法进行归纳总结。 　　1 微生物分析法 　　微生物分析法是利用微生物对特定维生素的极强特异性，且该维生素是微生物生长繁殖所必需的因子的原理。在一定条件下，微生物的生长繁殖速度与溶液中该维生素的含量有一定对应关系。 　　目前，微生物法主要应用于对维生素B6及维生素B12的研究。陈亚波等人先后对维生素饮料中的维生素B12、维生素B6进行测定：利用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 2830）对维生素 B12极高的灵敏性和特异性，定量测定试样中维生素 B12的含量；利用卡尔斯伯酵母菌（ATCC 9080）对维生素 B6极高的灵敏性和特异性，定量测定试样中维生素 B6的含量。此方法精密度良好，灵敏度高，结果准确；但是较难掌握，菌种复苏及活化一定要按照要求严格进行，且灭菌过程及试验过程都要尽量保持一致，一定要注意无菌操作、避免污染，以保证其结果准确、符合要求。随后陈亚波等人又利用植物乳杆菌ATCC 8014对烟酰胺的特异性，定量测定样品中烟酰胺的含量，方法?嗜房煽俊Ｍ踔疚暗热搜∪∠中械墓?标检测方法和试剂盒法两种微生物方法分别对6份小麦胚芽中维生素B6含量进行检测，结果表明：两种方法均有良好的线性关系，但是国标法样品中维生素B6的提取较为彻底，检测结果能够更准确地反映样品中维生素B6的含量。张旭等人经高压蒸汽锅水解、吸取合适浓度的检测样品到吡哆醇Y培养基中，接种卡尔斯伯酵母菌，于恒温箱中培养，最后用分光光度计在合适波长下测定酵母菌的生长，对应标准生长曲线求得样品中维生素B6含量。林耀文等人用缓冲溶液对样品进行处理，将测定液加到不含维生素 B12的培养基中，与戴氏乳杆菌共同培养后，使用紫外分光光度计于波长 600 nm 处测定含乳饮料中维生素 B12含量，此方法可有效测定含乳饮料中低水平维生素 B12含量，最低检出限为0.04 ng/mL。吴环等人建立了低温保藏测试菌液、缩小试验体积的快速检验维生素B12的方法，与传统方法相比，此方法操作简便、检测周期短、准确性高。 　　2 化学分析法 　　2.1 高效毛细管电泳法 　　高效毛细管电泳法是近年来发展最快的分析方法之一，其是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析方法，具有柱效高、分离速度快、溶剂和试样消耗少、成本低、选择性强等优点。 　　李小戈等人用胶束电动毛细管色谱同时分离测定5种水溶性维生素，以Na2B4O7 ―十二烷基硫酸钠作分离缓冲体系，分离电压14 kV，线性范围较宽，重现性好。司熊元等人在电压25 kV，40 mmol/L pH 8.40，磷酸二氢钾―硼砂缓冲液电泳条件下，实现了7种维生素7 min中内的良好分离。另外，司熊元等人比较了水浴萃取、超声波萃取以及SPE C18柱萃取对茶样中维生素分离效果的影响，结果表明SPE C18柱具有较好的纯化和富集作用，并采用此方法在柱温25 ℃、电压20 kV，20 mmol/L pH 8.80磷酸二氢钾―硼砂缓冲液的电泳条件下对茶树顶芽和叶片中7种水溶性维生素进行了检测，结果显示茶树顶芽中的水溶性维生素含量最高。柯月娇等人在分离电压18 kV，40 mmol/L Na2B4O7?10H2O（pH 8.50）的条件下，应用UV/VIS二极管阵列检测器对维生素B片和脉动饮料中的5种水溶性维生素进行测定，在6 min内得到基线分离。黄劲松等人研究缓冲溶液、工作电压等对维生素测定的影响，最终在电泳电压20 kV，20 mmol/L pH 8