促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究-内科学(内分泌代谢病学)专业论文.docxVIP

促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究-内科学(内分泌代谢病学)专业论文.docx

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促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究-内科学(内分泌代谢病学)专业论文

宁夏医科大学学位论文独创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进 行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明 引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品 成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明 宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文,同意学校按规定向国家有 关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权宁 夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公 布(包括刊登)论文的全部或部分内容。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 第一部分 促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究 摘 要 目的:通过促甲状腺激素(TSH)对人血管平滑肌细胞影响的研究,探讨 TSH 在动脉 粥样硬化发生发展过程中的作用。 方法:1、体外培养人血管平滑肌细胞,采用检测细胞存活和生长的方法(MTT 法) 检测促甲状腺激素对平滑肌细胞存活数量的影响;2、采用流式细胞仪法观察 TSH 对平 滑肌细胞增殖周期的影响;3、应用免疫组化法、Western blot 检测不同浓度 TSH 对平 滑肌细胞周期蛋白 D1、A 表达的影响;4、实时荧光定量法(RT-PCR)观察对平滑肌细 胞表型转换的影响。 结果:与对照组比较不同浓度的 TSH(0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L)可以促进平滑 肌细胞的增殖并且具有时间和剂量依赖性;不同浓度 TSH 作用于平滑肌细胞后,可以促 进细胞周期向 G2/M 期转换,并使细胞周期蛋白 D1、A 的表达量增加;TSH 还可促进平滑 肌细胞表型由收缩型向分泌型转换。 结论: TSH 可以促进人血管平滑肌细胞增殖,这可能是亚临床甲状腺功能减退患者 发生动脉粥样硬化的危险因素之一。 关键词:促甲状腺激素,血管平滑肌细胞,动脉粥样硬化 I Part 1 Effects of thyroid-stimulating hormone on the function of human vascular smooth muscle cells ABSTRACT Objectives: The purpose of the present research was to study the effects of TSH on human vascular smooth muscle cells (VSMCs) and to erplore the relationship betwee n TSH and atherosclerosis (AS). Methods: Cell proliferation was measured by the MTT assay. Cells were analyzed using a ?ow cytometer to determine the cell-cycle phase of each cell. For the purpose of detecting cyclinA and cyclinD, immunocytochemical staining and western blots were performed. Real-time PCR was used to assess the VSMCs phenotypes. Results: different concentrations of TSH could promote the transition of cell cycle phase G2 to phase M and increased the expression of cell cycle protein A and D1 of VSMCs. In addition, the results indicated that VSMCs undergo a phenotypic transformation from a contractile state to a synthetic state after treatment with different concentrations of TSH. Conclusion: TSH can promote VSMC proliferation and accelerate AS, an

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