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促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究-内科学(内分泌代谢病学)专业论文
宁夏医科大学学位论文独创性声明
本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进 行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明 引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品 成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
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年 月 日 年 月 日
第一部分 促甲状腺激素对人血管平滑肌细胞影响的研究
摘 要
目的:通过促甲状腺激素(TSH)对人血管平滑肌细胞影响的研究,探讨 TSH 在动脉 粥样硬化发生发展过程中的作用。
方法:1、体外培养人血管平滑肌细胞,采用检测细胞存活和生长的方法(MTT 法) 检测促甲状腺激素对平滑肌细胞存活数量的影响;2、采用流式细胞仪法观察 TSH 对平 滑肌细胞增殖周期的影响;3、应用免疫组化法、Western blot 检测不同浓度 TSH 对平 滑肌细胞周期蛋白 D1、A 表达的影响;4、实时荧光定量法(RT-PCR)观察对平滑肌细 胞表型转换的影响。
结果:与对照组比较不同浓度的 TSH(0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L)可以促进平滑 肌细胞的增殖并且具有时间和剂量依赖性;不同浓度 TSH 作用于平滑肌细胞后,可以促 进细胞周期向 G2/M 期转换,并使细胞周期蛋白 D1、A 的表达量增加;TSH 还可促进平滑 肌细胞表型由收缩型向分泌型转换。
结论: TSH 可以促进人血管平滑肌细胞增殖,这可能是亚临床甲状腺功能减退患者 发生动脉粥样硬化的危险因素之一。
关键词:促甲状腺激素,血管平滑肌细胞,动脉粥样硬化
I
Part 1 Effects of thyroid-stimulating hormone on the function of human vascular smooth muscle cells
ABSTRACT
Objectives: The purpose of the present research was to study the effects of TSH on human vascular smooth muscle cells (VSMCs) and to erplore the relationship betwee n TSH and atherosclerosis (AS).
Methods: Cell proliferation was measured by the MTT assay. Cells were analyzed using
a ?ow cytometer to determine the cell-cycle phase of each cell. For the purpose of detecting cyclinA and cyclinD, immunocytochemical staining and western blots were performed. Real-time PCR was used to assess the VSMCs phenotypes.
Results: different concentrations of TSH could promote the transition of cell cycle phase G2 to phase M and increased the expression of cell cycle protein A and D1 of VSMCs. In addition, the results indicated that VSMCs undergo a phenotypic transformation from a contractile state to a synthetic state after treatment with different concentrations of TSH.
Conclusion: TSH can promote VSMC proliferation and accelerate AS, an
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