促红细胞生成素在人乳腺癌细胞株中的表达及作用-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 英、汉缩略名词对照表1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要2 HYPERLINK \l _bookmark2 英文摘要5 HYPERLINK \l _bookmark3 前言8 HYPERLINK \l _bookmark4 材料与方法13 HYPERLINK \l _bookmark5 一、实验材料 13 HYPERLINK \l _bookmark6 二、实验方法 16 HYPERLINK \l _bookmark7 三、统计学分析 26 HYPERLINK \l _bookmark8 结果27 HYPERLINK \l _bookmark9 讨论39 HYPERLINK \l _bookmark10 全文小结43 HYPERLINK \l _bookmark11 参考文献44 HYPERLINK \l _bookmark12 致谢47 HYPERLINK \l _bookmark13 综述48 英、汉缩略名词对照表 英文缩写 AP 英文全称 Ammonium peroxydisulfate 中文全称 过硫酸铵 BCA COX-2 DEPC Bicinchoninic acid Cyclooxygenase-2 Diethypyrocarbonate 二喹林甲酸 环氧合酶-2 焦碳酸二乙酯 DMSO EB ECL ELISA EPO Dimethyl sulfoxide Ethidium bromide Enhanced Chemiluminescence Enzyme Linked Immunosorbent Assay Erythropoietin 二甲基亚砜 溴化乙锭 超敏电化学发光 酶联免疫吸附试验 促红细胞生成素 EPO-R FBS HRP MTT OD Erythropoietin receptor Fetal bovine serum Horseradish peroxidase Thiazolyl tetrazolium bromide Optical density 促红细胞生成素受体 胎牛血清 辣根过氧化物酶 四甲基偶氮唑蓝 光密度 PBS PCR PMSF PVDF RT Phosphate buffered saline Polymerase chain reaction Phenylmethanesulfonyl fluoride Polytetrafluoroethene Reverse transcription 磷酸盐缓冲液 聚合酶链反应 苯甲基磺酰氟 聚偏二氟乙烯 逆转录 SDS TBS TBST TEMED Tris Sodium dodecyl sulfate Tris-Buffered Saline Tris-HCL Tris-Buffered Saline Tween-20 N,N,N,N-Tetramethylethylenediamine Tris(hydroxymethyl)aminomethane 十二烷基硫酸钠 缓冲盐溶液 含吐温-20 的 TBS 四甲基乙二胺 三羟甲基氨基甲烷 rh-EPO Recombinant human erythropoietin 重组促红细胞生成素 1 促红细胞生成素在人乳腺癌细胞株中的表达及作用 中文摘要 目的：选取不同转移能力的乳腺癌细胞株（雌激素依赖低转移 MCF-7 细胞株和 雌激素不依赖高转移 MDA-MB-231 细胞株）作为研究对象，从 mRNA 及蛋白 质水平检测 促红细 胞生成素 （erythropoietin， EPO ）及促 红细胞生 成素受体 （erythropoietin receptor，EPO-R）的表达情况。选择合适的 rh-EPO 浓度作用于 乳腺癌癌细胞 MCF-7 和 MDA-MB-231，检测药物对乳腺癌细胞增殖、凋亡、分 化及侵袭转移潜能等生物学行为的影响，明确 EPO 在乳腺癌发生发展中的作用。 根据筛选出的 rh-EPO 作用剂量和作用的不同时间，观察炎性介质 COX-2 含量的 变化，探讨 COX-2 是否参与了 rhEPO 促进乳腺癌细胞增殖和侵袭转移的作用。 方法：1. 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术、蛋白免疫印迹（Western Blot） 方法及免疫细胞化学，检测乳腺癌 MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞株 mRNA 及蛋 白质水平 EPO 和 EPO-R 的表达情况。2. 经不同浓度 rh-EPO 处理后，用 MTT 法观察 rh-EPO 对肿瘤细胞增殖效应；AnnexinV-FITC/PI 双荧光染色和原位末端 脱 氧 核 糖 核 酸 转 移 酶 标