促红细胞生成素对低出生体重大鼠肾脏发育影响-儿科学专业论文.docxVIP

促红细胞生成素对低出生体重大鼠肾脏发育的影响 中文摘要 背景与目的：研究已经证实，低出生体重（low birth weight，LBW）与肾脏肾单 位数目减少密切相关，生后早期肾脏细胞凋亡的增加，可能是 LBW 大鼠肾单位数 目减少的重要机制，然而 LBW 能否引起发育期肾损伤在国内鲜有报道。促红细胞生 成素（erythropoietin，EPO）能够通过抗炎、抗氧化、减少细胞凋亡、修复损伤细胞 等发挥肾脏保护作用。本研究旨在探讨 LBW 与发育期肾损伤的关系，并通过在肾单 位发育关键期给予 LBW 组大鼠外源性 EPO，探讨 EPO 对 LBW 大鼠发育期肾损伤的 影响，以及 EPO 对 LBW 大鼠肾脏发育的影响。 方法：选择育龄期健康雌性 Sprague-Dawley （SD）大鼠孕期全程常规饲料（22% 蛋白）喂养，建立正常出生体重 Control 组对照大鼠模型，孕期全程低蛋白饲料（6% 蛋白）喂养，建立 LBW 大鼠模型。LBW 幼鼠分 LBW、LBW+EPO 两组，在生后的 第 2 天、第 4 天分别给予大鼠源的 EPO 5000IU/kg 腹腔注射，建立 LBW+EPO 大鼠 模型。选择各组雄鼠为研究对象，观察三组大鼠在生后 1 天、10 天、30 天肾脏组织 形态学变化、TUNEL 法检测肾组织细胞凋亡、Western Blot 检测肾组织 EPO、EPO 受体（EPO receptor，EPOR）、活化的 Caspse 3（CASP 3）蛋白的表达量；利用酸消 化法观察三组大鼠在生后 10 天肾单位数目的变化，并测量肾小球体积；在生后的第 30 天、6 周采集各组大鼠的当日血液及 24 小时尿液，检测血肌酐、尿肌酐，计算内 生肌酐清除率；利用电镜观察三组大鼠在生后 6 周时肾脏组织结构变化。 结果：（1）LBW 组大鼠出生体重明显低于 Control 组（P0.01）。（2）在生后 的 10 天、30 天 LBW 组大鼠的体重、肾重均低于 Control 组（P0.01）。（3）与 Control 组相比，LBW 组皮质区明显变薄（P0.05），生肾区占总皮质区厚度的百分比明显 增高（P0.05）；LBW 组大鼠在生后 10 天、30 天肾小管均出现不同程度的上皮细胞 水肿，而 LBW+EPO 组肾小管水肿明显减轻。（4）在生后 10 天，LBW 组大鼠肾小 球体积明显高于 Control 组（P0.001）；与 LBW 组相比，LBW+EPO 组大鼠肾小球 体积明显变小（P0.001）；LBW+EPO 组与 Control 组相比，两者无明显差异。（5） 中文摘要 促红细胞生成素对低出生体重大鼠肾脏发育的影响 在生后第 10 天 LBW 组大鼠肾单位数目明显低于 Control 组（P0.01）；与 LBW 组 相比，LBW+EPO 组大鼠肾小球数目未见显著提高。LBW+EPO 组与 Control 组相比， 两者肾小球数目差异亦具有统计学意义（P0.01）。（6）与 Control 组相比较，在生 后的 1 天、10 天、30 天 LBW 组大鼠肾小球的细胞凋亡指数均较高（1 天：P0.01； 10 天：P0.01；30 天：P0.05）；而与 LBW 组相比，LBW+EPO 组在生后 10 天的 凋亡指数明显下降（P0.01）。在生后的第 10 天，LBW 组大鼠肾小管的凋亡指数明 显高于 Control 组（P0.01），而与 LBW 组相比较，LBW+EPO 组大鼠肾小管的凋亡 指数明显下降（P0.01）。（7）与 Control 组相比较，在生后的 1 天、10 天、30 天 LBW 组大鼠肾组织 EPO、EPOR 蛋白表达量均较低（P0.05），与 LBW 组相比， LBW+EPO 组大鼠在生后的 10 天、30 天肾组织 EPO、EPOR 的表达量均升高（P0.05）。 而三个时间点 LBW 组大鼠活化的 CASP 3 的表达量却均较 Control 组高（P0.05）； 在生后的 10 天，LBW+EPO 组活化的 CASP 3 的表达量明显下降（P0.01）。（8） 在生后的 6 周，LBW 组大鼠肾小球脏层上皮细胞出现局灶性节段性足突融合和肾小 球系膜细胞增生，而 LBW+EPO 组肾小球脏层上皮细胞足突未见节段性融合，且肾 小球系膜细胞未见明显增生，然而三组大鼠之间的血肌酐和内生肌酐清除率均未见明 显的差异。 结论：1、在肾单位发育受限的 LBW 大鼠肾脏组织中 EPO 和 EPOR 的蛋白表达 量显著减低，提示内源性 EPO 和 EPOR 可能与 LBW 大鼠的肾单位发育障碍有关； 而外源性的 EPO 可能通过促进内源性 EPO 和 EPOR 的表达，在肾发育中起一定的作用。 2