促红细胞生成素在蛛网膜下腔出血后的保护作用-神经外科专业论文.docxVIP

独创性声费 本人声明所呈交的论文是我个人在导师的指导下教立进行 的研究工作。除了文中特别周以标注和致谢的地方外，论文不包 含其佳个人己经发表或撰写的研究成果。与我→同工作的同志对 本研究傲的任何贡献均已在选文中作了费确的说明并表示谢意 c 本人承担本声明的法律责任。 学位论文作者签名: 签字日期 z 年月曰 学位论文使用授权书声明 本人完全了解第二军运大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁 盘，允许论文被查阅和错 i窍。本人授校第二军重大学可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位 论文在解密后适用本授权书〉 学位论文作者签名: 导白兰队飞 签字日期: 年 月 5 签字日期: }-t7年「月 4 日 侃红细胞生成素在蛛网膜下腔出血后的保护作用 硕士研究生:黄新 导师:史继新教授 摘要 背景和困的 动脉瘤性蛛网膜下腔出血 (subarachnoid hemorrhage ，SAH) 后的 病理生理机制复杂，蛛网服下腔的血液及血液分解产物的毒性作用、氛自由基产 生、炎括王反应、 NO 途径及血管内皮饲亡等途径参与脑Jfn.管疫孪 Ccerebrovascular vasospasm. CVS)的发生和发展，上述病理生理变化多数又是造成脑损伤的原因。 临床上，药物治疗主要集中在预防和缓解脑血管疫孪和脑保护两方面。近年来， 促红细胞生成索 Cerythropoietín. EPO) 的脑保护作用已经得到广泛的研究。 在体内或体外的多种动物实验模型(包指缺血模型、压迫和挫伤模型、红旗氨酸 诱发的癫痛模型、多发性硬化模型及高血糖奇事模型)中都证实 EPO 对不同的致伤 因子均具有脑保护作用。并提出了多种机制解释 EPO 对神经的保护作用，包括抑 制活性氧家族和兴奋性氨黎酸一一谷氨酸的产生，剌激血管再生，调节突触转运， 抑制凋亡，调节炎症反应及神经营养作用等。最近的研究中发现 EPO 除了脑保护 作用外，对 SAH 后的 CVS 也有明显的缓解作用。 EPO 在 SAH 后缓解 CVS 和脑保护 作用目前处于动物实验研究阶段，对于 EPO 缓解 CVS 的机制并不明确，而且有关 利用 EPO 能否减较 SAH 后 CVS 和减少神经元死亡起到脑保护作用的研究，相关报 道甚少，国内未见报道.本研究试图在动物实验中验证 EPO 是否具有缓解 SAH 后 CVS 以及脑保护的作用，并通过分析血管内皮的凋亡情况和血管疫孪程度的关 系推断 EPO 保护航管内反是否可能是其缓解 CVS 的机制之一. 材料和方法 30 只雄性新西兰白兔，你重 2.8 3.3 kg ，随机平均分为5 组2 空 白组、阴性对照组(枕大池泼入生理盐水〉、 SAH 组、 SAH+安慰剂组和 SAH+rHuEPO 组.采用枕大池一次tl:血〈非抗凝自体动脉血 2ml)的方法建立 SAH 模裂。模型 建立后 48 小时，取脑脊液后采用活体灌注法将动物处死。留取主主底动脉标本及 颇叶皮层组织。用原位细胞凋亡检测法 CTUNEL) 分别检测基底动脉内皮细胞、 额叶皮层神经元凋亡情况，并通过测定基底动脉血管横截面积来判断有无脑血管 疫孪。用酶联兔疫吸附 (ELISA) 法测定脑脊液巾 S-100日蛋白含量。 结果 空白组和阴性对照组之间， SAH 组和 SAH+安慰剂级之间各项指标检测无 统计学差异.基底动脉横截面积测定的结果提示 SAH 组及 SAH十安慰剂组较空白 组和阴性对照组明显缩小 (PO.0 1) ，而SAH+rHuEPO 组较 SAH 组及 SAH十安慰 剂组明显增大 (PO.OI) ; TUNEL 染色显示 SAH+rHuEPO 组装底动脉内皮细胞、 颜叶皮居神经元凋亡程度较 SAH 组及 SAH+ 安慰剂组明显减轻 (P0.05); 而 SAH+rHuEPO 级脑脊液仔 100B 蛋白含最较 SAH 组和 SAH+ 安慰剂组明显减少 (P0.05) 。熬成功脉横戳回到积、内皮细胞凋亡率、神经元凋亡率和胸脊液 S100日 蛋白含量这四项指标两两之间均具有良好的相关性，其中基底动脉横戳面积和内 皮细胞凋亡率，神经元凋亡率和脑脊液 5100B 蛋白含量之间相关系数最高. 结论 早期使用 rHuEPO 能减少兔枕大池注血模型基底动脉内皮细胞的凋亡并减 轻 CV5 ，EPO 保护血管内皮细胞可能是其缓解 CVS 的机制; rHuEPO 经外周给药能 减轻兔枕大池淀lfIl模裂后脑皮层神经元的凋亡并降低脑脊液中 S-1008 蛋白含 量，对 S