儿童口腔高毒力变形链球菌HtrA缺陷株的构建鉴定及转化力的分析-口腔临床医学专业论文.docxVIP

出现了一条较明亮的特异性条带，500bp 为 HtrA 基因片段的 DNA 分子量。 第二组在 DNA 分子量为 710bp 处出现一条明显的亮条带，而第六组在此处 却未出现特异性条带，710bp 为红霉素抗性基因片段的 DNA 分子量[10]。第 三、四组分别在 DNA 分子量为 1200bp 和 1100bp 处各出现一条明亮的条带。 而第七、八组均未出现特异性条带，1200bp 和 1100bp 又分别为 HtrA 基因 上游引物序列合并红霉素抗性基因引物 HtrAUF/P1 和 HtrA 基因下游引物序 列合并红霉素抗性基因引物 HtrAUR/P2 的 DNA 分子量。 变形链球菌 HtrA 高毒力株与变形链球菌 HtrA 基因缺陷菌株的转化力比较 结果: 0～6 小时内，变形链球菌 HtrA 高毒力株和 HtrA 缺陷株都没有明显的生 长,P＞0.05,无统计学意义。 6～12 小时内，变形链球菌 HtrA 高毒力株和 HtrA 缺陷株都在逐渐增多， 但增长的速度都不是很快，P＜0.05，说明具有统计学意义。 12～24 小时内，变形链球菌 HtrA 高毒力株和 HtrA 缺陷株在明显的增长， 增长速度较快，P＜0.01，具有十分显著的统计学意义。 24～48 小时内，变形链球菌 HtrA 高毒力株和 HtrA 缺陷株再无没显著增长， P＞0.05,无统计学意义。 但总体来讲，变形链球菌 HtrA 高毒力株的增长速度，要高于变形链球菌 HtrA 缺陷株，P＞0.05,无统计学意义。 结论：通过基因重组等方法可以将变形链球菌 HtrA 高毒力株中的 HtrA 基 因敲除，经过 PCR 鉴定与实验结果相符，从而成功构建变形链球菌 HtrA 的缺陷株。 变形链球菌 HtrA 高毒力株的转化力要明显高于 HtrA 缺陷株，从而可以证 实 HtrA 与变形链球菌的毒力有关，此结论可以为儿童龋病的防治找到新靶 点[11]。 关键词：毒力因子；基因敲除；同源重组；PCR 扩增；靶点；HtrA 基 因；引物；重组质粒载体 （目的、方法、结果、结论、关键词均为四号黑体，其余为四号宋体） The research of Childrens oral high virulence of Streptococcus mutans HtrA deficient strain of Construction and transformation of force Abstract（小三号 Times New Roman 字体，加黑 居中） bjective: In early, this experiment group personnel has completed deciduous caries high HIV force strains filter and the restructuring mass grain carrier pUChtrKO of building, this experiment to will has filter out of deformation Streptococcus HtrA high HIV force strains recovery and in liquid medium TPY in the increased bacteria preparation feel State stimulus peptide cell[1], then again to which joined has building completed of restructuring mass grain, through gene of homologous restructuring[2] for deformation Streptococcus HtrA gene defects strains of building. Cell biology, molecular biology and utilization technologies, HtrA defective strains of Streptococcus mutans bacteria identification, identified as Streptococcus mutans and identification by PCR amplification to build complete bacterial HtrA defective strains of Streptococcus mutans. Finally will be built of HtrA defective str