儿童哮喘危险因素和TIM基因多态性研究-儿科学专业论文.docxVIP

*儿童哮喘危险因素和TIM基因多态性研究 * 摘 要 研究背景 哮喘是儿童时期最常见的慢性呼吸道变应性疾病，近些年来在全球范围有逐渐增 加的趋势[1,2]。大多数成年期哮喘由儿童哮喘发展而来，其病因既受环境因素的影响， 加的趋势[1,2] McIntire[4]在小鼠 11 号染色体上确定了一个可以调节T细胞和气道表型的基因座T 细胞和气道表型调节因子Tapr（T cell and airway phenotype regulator）,并在这一座位上 发现了一个新的基因T细胞免疫球蛋白粘蛋白域TIM (T cell immunoglobulin domain and mucin domain)基因家族，从此人们揭开了TIM家族的神秘面纱。人类的TIM 族有三个即：TIM-1、TIM-3 和TIM-4，定位于染色体 5q33.2[5-7]，此区域是哮喘的主 要遗传易感位点之一。TIM蛋白是TIM基因编码的I型跨膜蛋白，其基本结构包括N末 端免疫球蛋白V区(IgV)结构域、黏蛋白样结构域、跨膜区和一个带有磷酸化基序的胞 质尾区结构[8]。TIM基因家族在哮喘等变态反应性疾病和自身免疫性疾病的发生发展 中起到至关重要的作用[9]。TIM-1 是TIM家族第一个被发现也 在非洲绿猴的肾脏细胞中首次被发现[10]。后来被证实与人类甲型肝炎病毒受体human hepatitis A virus receptor，hHAVcr-1[11]及肾损伤分子 1 kidney injury molecule 1,KIM-1[12] 为同一分子。TIM-1 分子不仅选择性地表达在活化的CD4+T细胞表面尤其是Th2 细胞 表面，调节Th2 型细胞介导的免疫应答[4, 6]，还影响巨噬细胞在局部炎症中的作用[13]。 而TIM-3 分子主要表达在终末期的Th1 细胞表面，对Th1 细胞起负性调控作用[14, 15]。 TIM-4 是TIM-1 的天然配体，专一地表达在巨噬细胞，树突状细胞等抗原体呈细胞表 面，与TIM-1 结合后刺激Th2 细胞的增值和分化[16, 17]。因此，人类TIM基因家族在参 与Th1/Th2 细胞介导的免疫调节中起到关键作用[5] 研究目的 调查重庆地区儿童哮喘发病的相关因素，分析 TIM-1 基因多态性和 HAV 感染、 TIM-4 基因多态性与中国西南地区儿童哮喘的关系，为儿童哮喘的特异性预防和治疗 提供参考。 * 国家自然科学基金资助项目；重庆自然科学基因资助项目（CSTC,2007BB5062） 研究方法 1．以重庆第三军医大学附属西南医院儿科哮喘门诊或儿科病房 2007 年 6 月-2010 年 12 月期间哮喘儿童 413 例，采取数字随机法选取同期来院体检及就诊的非哮喘的儿 童 420 例作为对照。通过问卷调查和做相应检查，追溯哮喘病史并随访其治疗情况， 寻找哮喘发病的相关因素。 2．收集 2007-2010 年在本院儿科门诊及住院部就诊怀疑哮喘的所有儿童，选取均 检测SPT、TIgE、外周血EOS水平和肺功能的患儿 549 例，以[18]2003 年中华医学会儿 科分会呼吸组制定的儿童哮喘防治常规（试行）以临床标准（临床症状和肺功能）最 终确诊 358 例为哮喘（包括咳嗽变异型哮喘），191 例为其他疾病，包括上呼吸道感 染、肺炎、湿疹、荨麻疹、慢性咳嗽(非咳嗽变异型哮喘)、过敏性鼻炎、结核等。作 出受试者工作特征曲线（ROC曲线），确定诊断截断点（cut off points）TIgE为 88IU/ml， EOS为 288×106 个/L，为儿童哮喘的诊断提供参考。 3．选取 TIM-1 外显子 4（157insMTTTVP)和启动子区-416GC、-1454GA 两个 多态性位点和 TIM-4 基因启动子区的 rs6882076 和内含子区 rs4704727 两个位点。选 取哮喘组儿童 579 例,平均年龄 7.2 岁，对照组儿童 524 例,平均年龄 7.6 岁，采用聚合 酶链反应检测所有研究对象的 TIM-1 三个多态性位点和 TIM-4 两个多态性位点的基因 型及等位基因频率，并检测 HAV 感染状态，进行病例对照研究分层分析。 研究结果 1．调查 10 各相关因素，经非条件 logistic 回归分析，最终发现 6 个危险因素,其 中家族遗传性、特应性体质、皮肤点刺阳性、总 IgE 是儿童哮喘的高危因素；2 个保 护因素：母乳喂养和 HAV 感染。 2． 应用非参数法估计儿童哮喘的 3 种检验方法曲线下面积：EOS 为 0.699（95% CI 0.655～0.744），TIgE 为 0.827（95% CI 0.793～0.862），SPT 为 0.806（95