儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病机制和药物作用机制的探讨-儿科学专业论文.docxVIP

儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病机制 和药物作用机制的探讨 研究生：曾莉君 导 师：陈爱欢 专 业：儿科学 中文摘要 【目的】 1.了解白三烯（LTs）在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患儿 扁桃体/腺样体增生肥大发病中的作用。 2.了解 1＜OAHI≤5 的睡眠呼吸障碍（SDB）儿童体内的炎症水平，期望为 我国儿童 OSAHS 诊断标准再次修订时是否将 1＜OAHI≤5 的 SDB 儿童定义为 轻度 OSAHS 提供参考依据。 .探讨白三烯调节剂（LTM）和鼻内用糖皮质激素（ICS）有效缩小 OSAHS 患儿扁桃体/腺样体增生肥大从而缓解临床症状的机制。 .了解 ICS 是否有效抑制 OSAHS 患儿体内的 LTs 合成，期望为儿童 OSAHS 治疗药物和联合治疗方案的选择提供参考依据。 【方法】 在体研究： (一)比较 OSAHS 患儿（包括 OAHI＞5 组和 1＜OAHI≤5 组）和 RI 患儿体内 LTs 水平:收集“扁桃体/腺样体切除术（AT）”切除的 OSAHS 和 RI 患儿扁桃体/腺 样体组织，利用荧光定量 PCR 法检测扁桃体/腺样体组织中的 LTC4S mRNA 表 达水平，利用竞争性酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测扁桃体/腺样体组织中的 CysLTs 水平。 (二)了解 ICS 对 OSAHS（OAHI＞5）患儿体内 LTs 代谢的影响:收集 OSAHS-ICS 组和 OSAHS-对照组患儿手术的扁桃体/腺样体组织，利用荧光定量 PCR 法检测 扁桃体/腺样体组织中的 LTC4S mRNA 表达水平，利用 ELISA 法检测扁桃体/腺 1 样体组织中的 CysLTs 水平。 体外研究： (一)ICS 对扁桃体细胞增殖的影响:将 OSAHS（OAHI＞1）患儿手术切除的扁桃 体组织进行体外培养，加入不同浓度的布地奈德（BUD），37℃ 5%CO2 培养箱 培养 48 小时后利用内盐（MTS）法检测细胞总体增殖情况。 (二)ICS 对 LTC4S mRNA 表达及 CysLTs 分泌水平的影响:将 OSAHS（OAHI＞1） 患儿手术切除的扁桃体组织进行体外培养，加入不同浓度的 BUD，37℃ 5%CO2 培养箱培养 48 小时后利用 MTS 法检测细胞总体增殖情况。将细胞增殖抑制率为 25%，35%，50%相应的 BUD 浓度分别定义为低、中、高剂量 BUD。 在扁桃体 细胞中分别加入低、中、高剂量 BUD 混合培养 48 小时，离心，利用荧光定量 PCR 法检测重悬物中 LTC4S mRNA 的表达水平，利用 ELISA 法检测上清液中 CysLTs 分泌水平。 (三)LTM 对扁桃体细胞增殖的影响:将 OSAHS（OAHI＞1）患儿手术切除的扁 桃体组织进行体外培养，加入不同浓度的孟鲁斯特（MON），37℃ 5%CO2 培养 箱培养 48 小时后利用 MTS 法检测细胞总体增殖情况。 【结果】 1. 本研究共收集 33 例扁桃体/腺样体标本，其中 RI 组 7 例，OSAHS（1 ＜OAHI≤5）组 9 例[OAHI 均值为 3.19 次/ h（1.40～5.00 次/h）]，OSAHS（OAHI ＞5）组 10 例[OAHI 均值为 11.73 次/ h（5.40～23.77 次/h）]，OSAHS-ICS（OAHI ＞5）组 7 例[OAHI 均值为 14.27 次/ h（5.60～32.06 次/h）]。 2．OSAHS（OAHI＞5）组患儿扁桃体/腺样体组织中的 LTC4S mRNA 表达 水平明显高于 RI 组（Z=-2.150，P=0.032），OSAHS（OAHI＞5）组与 OSAHS （1＜OAHI≤5）组患儿扁桃体/腺样体组织中的 LTC4S mRNA 表达水平无明显 统计学意义差异（Z=-1.103，P=0.270）。OSAHS（1＜OAHI≤5）组患儿扁桃体/ 腺样体组织中的 LTC4S mRNA 表达水平明显高于 RI 组（Z=-1.960，P=0.050）。 3. OSAHS（OAHI＞5）组、OSAHS（1＜OAHI≤5）组和 RI 组的 CysLTs 水平分别为：6808.59±4297.12 pg/ml，2389.96±1341.04 pg/ml 和 1313.54±610.54 pg/ml。OSAHS（OAHI＞5）组患儿扁桃体/腺样体组织中的 CysLTs 水平明显高 于 RI 组（t=-3.328，P=0.005）和 OSAHS（1＜OAHI≤5）组（t=2.951，P=0.009）。 2 OSAHS（1＜OAHI≤5）组与 RI 组患儿扁桃体/腺样体组织中的 CysLTs 水平虽 然未达统计学意义差异（t=-1.960，P=0.07