二甲双胍对成骨细胞功能蛋白的调节作用与PPARγ活性变化的关系-内科学(内分泌与代谢)专业论文.docxVIP

目 录 英文缩略词表……………………………………………………… ...（1） 中文摘要……………………………………………………………...（3） 英文摘要……………………………………………………………...（5） 引言 ………………………………………………………………（7） 材料方法……………………………………………………………（9） 结果………………………………………………………………….（22） 讨论………………………………………………………………….（42） 结论………………………………………………………………….（45） 参考文献……………………………………………………………..（46） 致谢…………………………………………………………….. （49） 综述………………………………………………………………….（50） 英文缩略词表 ABBREVIATIONS 英文缩写 MET 英文名称 Metformin Hydrochloride 中文名称 盐酸二甲双胍 TZDs thiazolidinyldiones 噻唑烷二酮类 PIO Pioglitazone Hydrochloride 盐酸吡格咧酮 AMPK AMP-activated protein kinase 单磷酸腺苷激活的蛋 白激 酶 p-AMPK Phospho- AMP-activated protein kinase 磷酸化单磷酸腺苷激 活的 蛋白激酶 PPARγ Peroxisome proliferator-activated receptor 过氧化物酶增殖物活 化受 gamma 体 γ COM Compound C -- GW GW9662 -- MSCs mesenchymal stem cells 骨髓间充质干细胞 BMP-2 bone morphogenetic protein 骨形态蛋白 2 OCN osteocalcin 骨钙素 ALP alkaline phosphase 碱性磷酸酶 HDMEM high glucose dulbeccos modified eagles Medium LDMEM low glucose dulbeccos modified eagles Medium 高糖改良伊格（氏）培养基 低糖改良伊格（氏）培养基 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 PBS phosphate buffered sodium 磷酸盐缓冲液 DEPC diethylpyrocarbonate 焦碳酸二乙脂 SPSS statistical packagefor scoial science 社会科学统计学软件 1 OD optical density 光密度值 RIA radioimmunoassay 放射免疫分析法 RT-PCR reverse transcription polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链式反应 β-actin beta-actin 内参照基因 mRNA w d messenger week day ribonucleic acid 信使核搪核酸 周 天 h hour 小时 s second 秒 min minute 分钟 r round 转 rpm revolution per minute 每分钟转数 2 二甲双胍对成骨细胞功能蛋白的调节作用与 PPARγ活性变化的关系 中文摘要 目的 1. 观察调节PPARγ活性对成骨细胞功能蛋白表达的影响。 2. 观察二甲双胍对成骨细胞功能蛋白表达的影响以及与调节PPARγ表达的关系。 3. 了解二甲双胍对成骨细胞的上述影响是否独立于AMPK活性。 方法 1. 利用PPARγ抑制剂GW9662、PPARγ激动剂吡格咧酮分别抑制或激活PPARγ，干 预3w，观察不同干预条件下成骨细胞功能蛋白（BMP-2、ALP、骨钙素）以及PPARγ、 p-AMPK的表达变化情况。 2. 二甲双胍干预成骨细胞后，细胞的功能蛋白以及PPARγ、p-AMPK表达的变化 情况。 3. 二甲双胍干预AMPK活性被CompooundC抑制的成骨细胞，观察细胞功能蛋白以 及PPARγ、p-AMPK表达的变化情况。 4. 在CompooundC持续抑制AMPK活性基础上，观察二甲双胍对吡格咧酮介导的成 骨细胞功能蛋白表达抑制的影响，以及PPARγ表达的变化情况。 结果 1. 与正常对照组比较，抑制PPARγ活性，可促进成骨细胞功能蛋白及p-AMPK的表 达，。而激动PPARγ，结果则反之。 2. 与正常对照组比较，二甲双胍可促进成骨细胞功能蛋白及p-AMPK的表