二氯化钴对胃癌细胞SGC7901凋亡和增殖的影响-免疫学专业论文.docxVIP

2.4.2 ROS 含量的测定 22 2.4.3 免疫荧光检测缺氧细胞内缺氧蛋白水平的变化 23 Western Blotting 检测缺氧细胞内 HKⅡ和 HIF-1α 蛋白水平的变化 23 RT-PCR 检测缺氧细胞内 HKⅡ和 HIF-1αmRNA 水平的变化 24 2.5 缺氧对肿瘤化疗的影响 25 第三章 实验结果 26 3.1 胃癌基因表达谱 26 3.2 检测胃癌细胞系中 HKⅡ表达水平 26 3.3 缺氧细胞模型的建立 27 3.4 二氯化钴处理后对 SGC7901 细胞生物学行为的影响 28 3.4.1 MTT 法对细胞的生长情况进行分析。 28 3.4.2 应用划痕愈合实验分析 SGC7901 细胞的迁移能力 29 3.4.3 流式细胞术分析缺氧对细胞的凋亡的影响。 29 3.5.1 乳酸含量的测定 30 3.5.2 ROS 含量的测定 31 3.5.3 免疫荧光检测缺氧细胞内 HKⅡ和 HIF-1α 蛋白水平的变化 31 3.5.4 检测缺氧细胞 HKⅡ和 HIF-1α 表达水平的变化 32 3.6 缺氧对肿瘤化疗的影响 32 第四章 讨论 33 第五章 小结 38 参考文献 38 文献综述 42 致谢 50 攻读学位期间取得的研究成果 51 学位论文独创性声明 52 学位论文知识产权权属声明 52 英文缩略语表 缩略词 英文名称 中文名称 AP Ammonium Persulfate 过硫酸铵 bp Base Pair 碱基对 BlAST Basic local Alignment Search Tool 同源性比较搜索工具 BSA Bovine Serum Albumin 牛血清白蛋白 cDNA Complementary DNA 互补脱氧核糖核酸 DAB 3，3′-Diaminobenzidine 3，3’-二氨基联苯胺 DAPI 4，6-Diamidin-2-Phenylindo Dihydrochloride 4，6-二乙酰基-2-苯基吲哚 DEPC DiethylPyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 DMEM Dulbecco′s Modified Eagle Medium 培养基（富含氨基酸和葡萄糖） DMSO Dimethyl Sulfoxide 二甲基亚砜 Dnase Deoxyribonuclease 脱氧核糖核酸酶 dNTP Deoxy-ribonucleotideTriphosphate 脱氧核苷三磷酸 DTT Dithiothreitol 二硫苏糖醇 EB Ethidium Bromide 溴化乙锭 ECl Enhanced Chemi-luminescence 增强化学发光 EDTA EthyleneDiamineTetraaceticAcid 乙二胺四乙酸 FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清 KD Kilodalton 千道尔顿 Min Minute(s) 分钟 mRNA Messenger RNA 信使核糖核酸 MTT Methyl Thiazolyl Tetrazolium 噻唑蓝 NCBI The National Center for Biotechnology Information 全美生物技术信息中心 HKⅡ HexoxinaseⅡ 己糖激酶Ⅱ HIF-1α hypoxia induced factor-1 alpha 缺氧诱导因子 1α ROS Reactive oxygen species 活性氧族 PAGE Polyacrylamide Gel Electrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS Phosphate-Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 Rnase Ribonuclease 核糖核酸酶 Rpm Revolutions Per Minute 每分钟转速 RT-PCR Reverse Transcription PCR 逆转录 PCR SDS Sodium Dodecyl Sulfate 十二烷基磺酸钠 SDS-PAG SDS-Polycrylamide Gel Electrophoresis SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 CoCl2 Cobalt chloride 二氯化钴 5 二氯化钴对胃癌细胞 SGC7901 凋亡和增殖的影响 中文摘要 研究背景及目的 恶性肿瘤在生长过程中，由于组织增殖过快造成局部组织严重缺氧 和能量代谢不平衡。肿瘤细胞的失控性生长和极度的机体耗能，不仅导致细胞生存微 环境的改变，也导致细胞的供能方式发生变化，以有氧氧化为主转变为以糖酵解为主。 肿瘤细胞代谢异常和