二甲双胍联合放疗对结直肠癌SW480和HCT116细胞增殖凋亡的实验研究-普通外科学专业论文.docxVIP

目 录 中英文缩略词表 3 中文摘要 5 英文摘要 7 前言 9 第一部分 二甲双胍联合放疗对结直肠癌细胞增殖凋亡的影响及机 制的初步探讨 材料和方法 12 结果 23 讨论 29 第二部分 二甲双胍联合放疗诱导结直肠癌细胞凋亡的分子机制研究 材料和方法 32 结果 39 讨论 40 全文小结 43 参考文献 44 致谢 47 综述 48 2 中英文缩略词表 英文缩写 ADORA1 英文全称 Adenosine A1 Receptor 中文 腺苷 A1 受体 AMP AMPK ATP Adenosine monophosphate AMP activated protein kinase Adenosine triphosphate 单磷酸腺苷 腺苷酸活化蛋白激酶 三磷酸腺苷 ATM Ataxia-telangiectasia mutation 毛细血管扩张性共济 失调症 Bcl-2 cAMP Caspase B-cell lymphoma-2 Cyclic adenosine monophosphate Cysteinyl aspartate specific protein B 淋巴细胞瘤-2 基因 环磷酸腺苷 半胱氨酸天冬氨酸特 异性蛋白酶 CC Compound C 腺苷酸活化蛋白激酶 抑制剂 CCK-8 DMSO Cell Counting Kit-8 Dimethyl sulfoxide CCK-8 试剂盒 二甲基亚砜 DSB FBS FCM GAPDH Double-Strand Break Fetal Bovine Serum Flow cytometry glyceraldehyde-3-phosphate 双链断裂 胎牛血清 流式细胞术 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 dehydrogenase h IR Met min ml Hour Ionizing Radiation Metformin Minute Milliliter 小时 电离辐射 二甲双胍 分钟 毫升 mRNA messenger RNA 信使 RNA mTOR Mammalian target of rapamycin 哺乳动物的雷帕霉素 靶体 OD Optical density 光密度 3 英文缩写 PAGE 英文全称 Polyacrylamide gel electrophoresis 中文 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液 PI PVDF RPMI-1640 qRT-PCR rpm Propidium iodide polyvinylidene fluoride Rose Park Memorial histitute-1640 Real time Quantitative PCR Rotation per minute 碘化丙啶 聚偏二氟乙烯 RPMI-1640 培养基 实时定量 PCR 每分钟转速 SDS TEMED Sodium dodecyl sulfate N,N,N,N-Tetramethyl ethylenediamine 十二烷基磺酸钠 四甲基乙二胺 4 二甲双胍联合放疗对结直肠癌 SW480 和 HCT116 细胞 增殖凋亡的实验研究 摘 要 目的： 观察二甲双胍与放疗联合应用对人结直肠癌 SW480 和 HCT116 细胞的增殖 凋亡作用，并探讨其可能的相关机制。 方法： 1、采用 cck-8 法检测不同浓度的二甲双胍、不同剂量的 X 射线及二甲双胍 联合 X 射线对人结直肠癌细胞增殖的影响。 2、应用平板克隆形成实验和流式细胞术检测单用二甲双胍、单用 X 射线、 二甲双胍联合 X 射线等不同干预后人结直肠癌细胞的生存及凋亡情况。 3、运用基因表达谱芯片技术分析人结直肠癌 SW480 和 HCT116 细胞在对照 组、单用二甲双胍组、单用 X 射线组、二甲双胍联合 X 射线组中基因的表达差 异，为后续的机制研究提供新的线索。 4、采用定量 PCR 验证基因芯片的分析结果，同时检测细胞在不同方式处理 后，细胞中 ADORA1、Caspase3、Caspase9、Bcl-2 的 mRNA 表达情况。 5、应用 Western Blotting 检测不同方式处理细胞后相关蛋白的表达情况。 结果： 1、cck-8 结果显示：不同浓度（1、5、10mmol/l）二甲双胍对细胞的增殖有 抑制作用，并存在浓度、时间的依赖关系；同时，不同剂量（2、4、6、8、10、 12Gy）X 射线对细胞也有增殖抑制作用，但在 8Gy 时对细胞的增殖抑制作用最 明显；在二甲双胍（1mmol/l）与 X 射线（8Gy）联合