二神丸中药物炮制前后的对比及其谱效关系的研究-药剂学专业论文.docxVIP

摘 要 中药炮制和复方入药是中医用药的两大特色，将补骨脂和肉豆蔻炮制前后分 别纳入复方二神丸中，形成四个组合，采用中药 HPLC 指纹图谱和气质联用技术 全面分析炮制对其化学成分的影响，利用药效学实验比较不同二神丸组合温脾止 泻的药效差异，选出最佳炮制品组合。以二神丸的最佳炮制品组合为研究对象， 经系统溶剂法分离为五个部位，建立不同部位的 HPLC 指纹图谱，并比较其温脾 止泻的药效，采用灰关联分析法建立谱效关系，定位对其药效贡献较大的色谱峰， 将液相色谱与质谱联用，定性主要药效成分。 实验结果表明，二神丸四个组合的指纹图谱和气质联用总离子流图色谱峰的 保留时间和峰面积都有一定的差异，即所含化学成分的种类和含量有所不同，可 能导致其生物活性存在差异；盐炙补骨脂和麸煨肉豆蔻组合的二神丸Ⅳ可明显降 低番泻叶所致急性腹泻小鼠的腹泻指数及健康小鼠的小肠推进率和胃排空率，提 示二神丸中药物炮制后可增强其温脾止泻的作用，即二神丸治疗脾肾阳虚之五更 泄泻，其组成药物补骨脂需盐炙、肉豆蔻需麸煨。 二神丸Ⅳ产生药效的主要为极性较小的化学成分，石油醚部位效果最明显， 经谱效关系的建立可定位对其药效贡献较大共有峰主要有 6＞18＞7＞20＞14＞ 21＞1＞25＞24＞23＞4＞3＞8＞11 号，且这些共有峰的关联度相差较小，因二 神丸挥发性成分对其药效也密切相关，尚需采用 GC 法研究其谱效关系，以定位 对其药效贡献较大的挥发性成分；经液相色谱与质谱联用可初步推测 3 号峰为补 骨脂素，4 号峰为异补骨脂素，7 号峰为新补骨脂异黄酮，8 号峰为补骨脂甲素， 11 号峰为肉豆蔻异木脂素，14 号峰为 corylifol D，18 号峰为异补骨脂查尔酮， 20 号峰为补骨脂二氢黄酮甲醚，21 号峰为补骨脂异黄酮，25 号峰为补骨脂酚， 1 号峰和 6 号峰为两种或多种化学成分的混合物，23 号峰和 24 号峰未知，药效 成分的推测结果有待采用核磁共振等方法进一步研究。二神丸Ⅳ温脾止泻的药效 即可能为以上成分共同发挥作用。 关键词：二神丸 炮制 谱效关系 药效成分 I Abstract Processing of traditional Chinese medicine and compound medicine are the two major characteristics of Chinese medicine.Semen psoraleae and nutmeg before and after processing have been respectively combined into compound Ershen Pill and then four kinds of Ershen Pill combination have been formed.By HPLC fingerprint and GC-MS technologies,the influence of processing on the chemical compositions of Ershen Pill have been fully analyzed.And the effects of warming the spleen to stop diarrhea have been compared by efficacy experiments,in order to select the best Ershen Pill combination. Using the best Ershen Pill combination as a proxy,five parts has been separated by the means of systematic solvent extraction. Afterwards, the HPLC fingerprints of different parts have been established and the effects of warming the spleen to stop diarrhea have been compared.By correlation analysis, the spectrum effect relationship has been established to locate the chromatographic peaks which contribute to the effect.Finally the method of LC-MS has been used to determine these effective