多形核白细胞在大鼠脑缺血再灌注损伤中局部浸润的机制分析-神经病学专业论文.docxVIP

茹形核白 再灌注损伤中周部浸润 的机制研究 藏士研究生 z 宋波 导师:闰福岭 !许予明 郑州大学第一附属医院神经内科 郑州I 450052 搞要 炎症反应在缺血性脑血管疾病的病理损伤过程中的作用机制是近年来研究 的热点，研究人员已经观察到缺血性熔损伤后局部炎饺缀媳浸润琉象， 1-2 天 内主要以多形核自细胞( polyrnorphonuclearωlls 戒严lyrnorphonuclear leukocytes ， 冉耐s 或 PMNLs) 浸满为主， PMNs 可能通过以下几个途径介导黯缺血得灌注损 伤: (1)PMNs 粘附和聚集造成微血管阻塞，血流量降低: (2)PMNs 产生大蠢 的氧自由基，引起脂质过氧化反应，这是再灌注损伤最重要害的发生机制以 3)PMNs 释放自三烯和前列腺素等生物活性物质，导致血管收缩等; (4) 活化的 PMNs 释放弹性蛋白酶，降解细胞外基质成分，导致问质水肿。但 PMNs 局部浸润的作 用机制还不十分清楚，卫在课题拟在建立大鼠黯缺应再灌注( ischemiaJrepe治ZSion ， I/R)损伤模型的基础上，研究核因子 K B (nuclear factor kappa B ，N弘 K B) 、 缀施部粘附分子- 1 (intercellular adhesion molecul时， TCAM-l)、巨噬细胞炎位 蛋白一 1 (macrophage inf1ammatory protein-l ，MIP- l)等炎症因子的时程变化规 律，并通过检测槌过氧化物酶 (myelop母roxidase，MPO) 反映 PMNs 的浸润情况， 以期探讨这些炎性因子在 PMNs 局部浸润过程中的作用机制，为缺血性脑血管病 的抗炎治疗提供理论依据。 材科与方法 g 健康，雄性 SD 大鼠 84 只，随机分为对照组 (12 只)，假手术组( 12 只)， 手术组〈包括 IIRlh 组、lIR3主线， I/R6h 组、1IR 12主纽军Il IIR24主缀，每组 12 只〉。 手术组采用线检法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型，缺血时间为 lh ，假手术组 郑州大学 2003 届硕士生学位论文 事形核臼细胞在大鼠脑缺血再灌注损伤中局部浸润的机制研究 做手术但尼龙线仅插入颈外动脉，对照绕不做任何手术。分别在将应时间点处死 大鼠后，取脑，每组 6 只用于制做脑组织匀浆， 6 只用于制做脑组织蜡块。用 ELISA 法测定脑组织匀浆中 ICAM-l 与 MIP-l 的浓度;用免疫组化方法检测切片 NFKB65 与 MPO 的着色鳞况，并应用计算机图象分析系统进行灰度分析，同时观 察病理变化。 结果z 1. NF-K 865 在对照组和假手术组未见着色，再灌注后 lh 开始着色(灰皮 值为 99.95 士4.82) ，3h 达高峰(灰度值为 92.06 :1:3.38，与其它各级比较P0.05) ， 之后开始下降，但 24h 仍处于较高水平〈灰度值为 141.48士 3.4的。本实验还发 现在神经细胞和血管内皮细胞上有 NF-K 8 着色。 2. ICAM-l 在对照组与假孚术组有低浓度表达，两者比较完差异，大鼠脑 缺血再灌注后 Ih 就开始表达 (62.09 :1:2.52n扩时，与对照组和假手术组相比 P0.05) ，于12h 达高峰(160.21主3.05 盟掉11，与其它各级相比均P0.05) ，其 后开始逐渐下降，但在 24h 时仍处于较商水平(1 33.91 士3.05 ng/ml) 。 3. MIP-I 在对照级与假手术经有低浓度表达，离者比较无差异，大鼠黯缺 血再灌注后 lh就开始表达(19.98士2.13pg/ml，与对照组和假手术组相比P0.05) ， 12h 达高峰 (61.34士3.06 pg/岖，与其它各级榕比均 P0.05) ，其后开始逐渐下降， 但在 24h 时仍处于较高水平 (49.46 土3.08 pg/ml)。 4. MP。在对照级与假手术级未见表达，在缺血再灌注6h 开始表达(灰皮 值为 150.88土 4.68) ，24h 达高峰(灰度值为 82.22:1:3.96，与其它各组比较P0.05) 。 结论$ 1. 本实验验证了 PMNs 浸润是大鼠撼缺血再灌注损伤的主重要病理机制。 2. NF-K B65 参与了大鼠脑缺血再灌注损伤过程，其作用机制可能在于通 过漓节 ICAM-I 与 MIP-l 表达，主堂而增加 PMNs 在损伤脑组织中的浸润。 3. 大鼠脑缺血再灌注损伤时 ICAM-l 、MIP-I 表达升高，分别通过促进 PMr司s 与微血管内皮的幸运附和趋化 PMNs I句缺直在草草组织主运向移动，参与冉的茧的 局部浸润。 4.