促皮质素与地塞米松联用对家兔肾上腺皮质的影响-药理学专业论文.docxVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 研究论文 促皮质素与地塞米松联用对家兔肾上腺皮质的影响 前言……………………………………………………………………6 材料与方法……………………………………………………………8 结果……………………………………………………………………15 附图……………………………………………………………………17 附表……………………………………………………………………21 讨论……………………………………………………………………23 结论…………………………………………………………………27 参考文献……………………………………………………………28 综述 糖皮质激素作用的两重性…………………………………………31 致谢…………………………………………………………………………46 个人简历……………………………………………………………………47 促皮质素与地塞米松联用对家兔肾上腺皮质的影响 摘 要 糖皮质激素（GC）的分泌，受到下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPAA）的 控制。外源性糖皮质激素会抑制促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和 促皮质素（ACTH）的分泌，若外源性糖皮质激素应用时间较长，就会产 生肾上腺糖皮质激素分泌不足，并可引起肾上腺萎缩。 曾有注射 ACTH 作为 GC 的替代疗法。但因 ACTH 制剂多来自牛、 羊、猪垂体，易引起过敏反应，现已少用。若采用 GC 与 ACTH 联合应 用，GC 对肾上腺皮质的反馈性抑制作用，有可能被 ACTH 的刺激作用所 拮抗；而 ACTH 制剂引起之过敏反应，亦可被作为免疫抑制剂的 GC 所 缓解。 目的：本研究试图通过 GC 联合 ACTH 应用，探索外源性 GC 治疗 的新方法。 方法：本研究主要利用家兔作为实验对象，分为正常对照组（NC 组）、 地塞米松组（DEXA 组）、地塞米松高剂量+促皮质素低剂量组（HDLA 组）、地塞米松低剂量+促皮质素高剂量组（LDHA 组）。经上述不同手 段处理后，利用 TUNEL 染色及免疫组化技术，对各组垂体前叶细胞的 凋亡情况及肾上腺皮质萎缩程度做出评判；利用免疫组化技术与逆转录 聚合酶链式反应（ RT-PCR）技术，对各组肾上腺皮质的 ACTH 受体表 达水平做出评判；以酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组动物皮质酮 的释放能力，从多角度、多层次综合评判 GC 联合 ACTH 的应用价值。 结果： 1 肾上腺皮质束状带 HE 染色： DEXA 组（0.35 mm± 0.05mm）和 HDLA 组（0.37 mm± 0.04 mm）束状带萎缩，厚度明显低于 NC 组（0.72 mm± 0.08 mm）（P0.01）；LDHA 组（0.69 mm± 0.13 mm）萎缩不明显 （P0.05）。 2 垂体前叶细胞凋亡情况： NC 组没有可见的凋亡细胞；DEXA 组 细胞凋亡率(13.5%±1.3%)与 HDLA 组(14.5%±2.2%)明显高于 LDHA 组 (3.7%±0.9%)（P0.01）。 3 ACTH-R mRNA 在肾上腺皮质中的表达：DEXA（0.572±0.363）组 及 HDLA 组（0.634±0.177）肾上腺皮质中 ACTH-R mRNA 的表达显著低 于 NC 组（0.955±0.159）及 LDHA 组（0.935±0.166）（P0.01）。 4 ACTH-R 在肾上腺皮质中的表达：DEXA 组（4.333±1.241）及 HDLA 组 （ 4.667±1.696 ）促皮质素受体的表达积分均显著低于 NC 组 （9.667±2.155）（P0.01），LDHA 组（9.333±1.974）有轻度下降，但 与 NC 组相比无显著差异（P0.05）。 5 皮质酮测定： DEXA 组（297 ng/ml±32 ng/ml）与 HDLA 组（278 ng/ml±30 ng/ml）的 30min 皮质酮分泌显著减少（P0.01），LDHA 组（386 ng/ml±41 ng/ml）皮质酮分泌轻度下降，但与 NC 组（402 ng/ml±41 ng/ml） 相比无显著差异（P0.05）。 结论： 1 相对高剂量 ACTH 联合低剂量 GC 能够显著减轻长期应用外源性 GC 引起的肾上腺皮质萎缩、分泌功能下降及 ACRH-R 受体表达减少。 2 相对高剂量 ACTH 联合低剂量 GC 能够显著降低长期应用外源性 GC 引起的垂体前叶细胞凋亡现象。 关键词： 糖皮质激素, 促皮质素, 地塞米松, 皮质酮, TUNEL 染色, 免疫组化, 逆转录聚合酶链式反应, 酶联免疫吸