w06 -GAS结果分析.pptxVIP

Genome-wide Association Study---GWAS 发展历史 1996年－Risch最早提出了GWAS设想； 2001年－Hansen等最早应用GWAS于植物Sea beet的研究中； 2005年－Klein等在Science杂志上最早报道了GWAS在人类中的研究，发现了与年龄相关性的黄斑变性病症显著相关的基因。 什么是GWAS 全基因组关联分析：利用全基因组范围内筛选出高密度的分子标记对所研究的群体进行扫描，分析扫描得出的分子标记数据与表型性状之间关联关系的方法。即：GWAS利用全基因组范围内的LD（连锁不平衡）来确定影响某些表型性状或数量性状的基因。 分子标记 是遗传标记的一种 遗传标记（genetic marker）：指可追踪染色体、染色体某一阶段、某个基因座在家系中传递的任何一种遗传特性。 基本特征：可遗传性、可识别性 遗传标记类型 形态标记（morphological markers） 细胞学标记（cytological markers） 生化标记（biochemical markers） 分子标记（molecular markers） 形态学标记 能够用肉眼识别和观察，并能明确显示遗传多态性的外部形态特征 优点：简单直观、经济方便； 缺点：标记数少、多态性低、容易受环境条件的影响、并且有一些标记与不良形状连锁。 细胞学标记 能够显示遗传多态性的细胞学特征。主要指染色体核型、带型和数量特性的变异等，它们反映了染色体在结构和数量上的遗传多态性。 染色体核型：数量、大小、着丝粒位置等； 染色体数量：单体、缺体、三体等； 染色体结构：缺失、易位、倒位、重复等。 特点： 优点：不易受环境影响，呈孟德尔方式遗传； 缺点：常伴有对生物有害的表型效应，难以获得相应的标记材料；或者观测和鉴定比较困难；需要花费较大的人力和较长时间来培育，难度较大等。 生物标记 是指以生物体内的某些生化形状作遗传标记，如血型、血清蛋白、种子储藏蛋白、同工酶和等位酶等。 特点： 优点：表现近中性，对生物经济性状一般没有大的不良影响；直接反映基因产物差异，受环境影响较小。 缺点：可用标记数量少，染色方法和电泳技术有一定难度。 分子标记 广义：是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。 狭义：DNA标记，指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异DNA片段。 优势： 直接以DNA的形式表现，在生物体的各个组织、各个发育阶段可检测到，不受季节、环境限制。 数量多 多态性高； 表现为中性，不影响目标形状的表达 许多标记表现为共显性，能区别纯合体和杂合体 第一代：限制性片段长度多态性 (Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP) 第二代：微卫星多态性（microsatellite） 第三代：SNP SNP：Single Nucleotide Polymorphism，单核苷酸多态性 指同一位点不同等位基因 之间核苷酸的差异。 分子标记 理论上讲，SNP既可能是二等位多态性，也可能是3个或4个等位多态性，但后两者非常少见，几乎可以忽略； 占所有已知多态性的90%以上； SNP数目：目前，测得大约1500～3000万个SNP位点。 分为：同义SNP（synonymous SNP）和非同义SNP（non-synonymous SNP）。 SNPs的基因型 人体除性染色体外，每个染色体都有两份，个体所拥有的一对等位基因的类型称作基因型。 核定个体的基因型，称作基因分型。 SNP 双等位基因标记 主要等位基因（major allele）：在一般人群中较多见的等位基因； 次要等位基因（minor allele）： 四种可能的形式 一种转换（ CT或GA）：2/3 三种颠换（CA或GT, CG或GC，TA或AT） SNP作为遗传标记的优势 变异程度不如微卫星 数量巨大，分布密度高：人类基因组中1SNP/1000bp 更稳定的遗传特性：多数并不位于基因编码区，甚至不在基因区，稳定而无害 基因分型简单：快速、大批量、自动化 SNP概念界定 基因组DNA的差异 cDNA中发现的：可能是RNA编辑的结果？ 单碱基的插入和缺失？ 疾病易感等位基因？ 在正常人（无病个体）中可出现 SNP mutation 基因型和表型 SNP的检测 PCR SNP芯片 新一代测序 …… GWAS的目的 寻找哪些SNP标记与疾病相关 关联分析 基本流程 建立研究群体，选择尽可能大的群体作研究样本，建立目标性状数据库。 提取样本DNA，进行质量控制以达到基因分型的要求，对基因型数据进行检测和质量控制以达到后续关联分析的要求。 利用合适的统计模型对SNP和目标性状进行关联分析； 对关联分析的结果进行高级分析及验证。 关联分析 G