天竺桂叶挥发油的提取及抗炎活性研究..docVIP

天竺桂叶挥发油的提取及抗炎活性研宄 ：蔡建秀，吴文杰，陈晓梅 】目的研究天竺桂挥发油的最佳提取工艺和抗 炎活性。方法通过蒸馏法，探讨天竺桂挥发油的最佳提取工 艺，测其精油的得油率，并且通过对小鼠耳廓二甲苯致肿的 影响、对小鼠蛋清致足跖肿胀的影响和对醋酸致小鼠腹腔毛 细血管通透性增加的影响等急性毒性实验测定天竺桂挥发 油的抗炎作用。结果天竺桂叶挥发油最佳提取条件为加水量 4倍，浸泡时间6h;毒性实验表明天竺桂叶片挥发油对机体 炎症有显著的抑制作用。结论天竺桂具较好的抗炎活性，在 临床上可用于治疗风湿痹证所致的发热、关节红肿等。 关键词】天竺桂挥发油提取抗炎 天竺桂[1 ?3] Cinnamomumj aponicumSieb,樟科樟属 植物。又名天竺桂、山肉桂、土肉桂、野桂，以树皮和叶入 药。木材含精油、丁香酚、芳樟醇、a-水芹烯、对伞花烃 等。常绿乔木，高迗7?10m。叶互生或近对生；柄长2?4cm; 叶片革质，长椭圆形，长6?12cm，宽2?3cm，先端渐尖， 基部窄楔形，全缘，上面深绿色，下面粉白绿色，主脉离基 三出，枝、叶均有肉桂香气。夏季开淡黄色花，数朵成伞形 花序生于当年枝叶腋，花序梗长于叶柄；花径4mm,花梗长 约7mm;花被深6裂，广卵形，内面有短毛；雄蕊12个，4 轮，最内一轮退化。桨果椭圆形，长cm,成熟时黑色。花期 6月，果熟期12月。 天竺桂树姿蔚秀，树皮和叶散发怡人香味，为良好的观 赏树、保健树以及营造混交林和隔离防护林的树种。产于我 国江苏南部、安徽南部、浙江、湖北东南部、江西、福建和 台湾等地。朝鲜、日本也有分布。 目前对于挥发油的提取实验已经有了很多的报道［4］， 但是尚未见对于从天竺桂中提取挥发油及毒性实验的报道。 笔者将利用正交法测定天竺桂叶片挥发油的最佳提取工艺， 比较哪种工艺得油率高，并进行动物急性毒性实验分析，以 期为进一步开发其药用价值提供理论依据。 1材料与仪器材料 天竺桂叶片，采自泉州师范学院崇福校区实验楼前，洗 净后自然阴干。 动物 ICR清洁级小鼠，雌雄各半，重量20?22g。 试剂与仪器 牛黄解毒片，伊文思蓝，蛋清，生理盐水，醋酸。电热 套、电子天平、粉碎机（FZ10 2型）、灌胃器，注射器，V-1100 型分光光度计。 2方法 天竺桂叶挥发油最佳提取工艺的测定 提取方法取自然阴干的天竺桂叶片粉末50g,用蒸馏法 提取挥发油并测定含油量。步骤如下［5］:将称重的50g样 品装入烧瓶中，加入水与玻璃珠数粒，振摇混合后，浸泡一 定时间，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加 水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。 置电热套中缓缓加热至沸，并保持微沸一定时间，停止加热， 放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层 上端到迗刻度0线上面5腿处为止。放置lh以上，再开启活 塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，读取挥发油量， 并计算供试品中含挥发油的百分数。 筛选指标以所提取挥发油的量（体积）为本提取工艺条 件的筛选指标，可直接由挥发油测定仪读取。 考察因素及水平的选择根据预实验，选择加水倍数、浸 泡时间及提取时间等可影响挥发油提取量的条件为考察因 素。由此，以加水倍数、浸泡时间、蒸馏时间3因素3水平， 按L9正交实验法安排实验［6］。结果见表1。表1正交实 验设计 正交实验及结果 根据表1，按其设计的条件和方法，分别提取挥发油， 读取挥发油刻数。结果见表2。表2正交实验结果 天竺桂叶挥发油抗炎实验［7］ 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响小鼠16只，体重20 22g ,随机分成4组。天竺桂挥发油高剂量组2ml *kg-l，低 刻量组lml ? k g-1,阳性对照组（牛黄解毒片5mg /只）及空 白组（生理盐水每只ml）,给药1次/d，连续3d。末次给药 lh后分别将20 ul二甲苯涂于小鼠右耳反正两面，左耳不涂 作为对照,45min后处死小鼠，用直径4mm打孔器打下左右耳， 分析天平称重，左耳做对照，计算肿胀率。结果见表3,图1。 表3挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 对蛋清致小鼠足跖肿胀的影响 小鼠16只，体重20?22g，随机分成4组。天竺桂挥发油 高剂量组2ml ? k g-1,低剂量组lml ?kg-l，阳性对照组（牛 黄解毒片每只5mg）及空白组（生理盐水每只ml）,每天1次给 药，连续3d。末次给药lh后，在小鼠右足跖部皮下注射10% 蛋清液50 u 1 , 3h后处死小鼠，沿踝关节的标记线剪下双足， 2。表4挥发油对蛋清 2。表4挥发油对蛋清 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响小鼠 12只，体重2 0?22g，随机分3组。天竺桂挥发油高剂量组 2ml ?kg-l，低剂量组lml -kg-1,空白组（生理盐水每只ml）， 1次给