天疱疮抗原、抗体及其临床意义..docVIP

天疱疮抗原、抗体及其临床意义 关键词：抗体 天疱疮是累及皮肤黏膜的一种自身免疫性大疱性疾病。 目前已证实天疱疮是以患者体内出现针对自身表皮角质形 成细胞上的桥粒芯糖蛋白的靶抗原；Dsg3的分子量约为1 30KD，主要分布于表皮基底层，在基底层上层的角质形成细 胞表面，是寻常性天疱疮的靶抗原。杨春俊等［2］在天疱疮 抗原的定位研究中，用金标记包埋后采用免疫荧光技术，发 现PF和PV的靶抗原在角质形成细胞间的部位相同，均位于 桥粒复合体上。Dsgl及Dsg3分子同其他钧粘素分子一样具 有5个串联重复、大小大致相等的胞外结构域各亚类在致病 中的作用，在培养的组织中加入纯化的天疱疮抗体IgGl? IgG4,免疫荧光检查发现IgG4的荧光最强，其次为IgG3、 IgGl, IgG2,说明I gG4与抗原有较强的亲和力。而当各亚型 浓度相同时，致培养表皮细胞棘层松解程度相同。另外，在 培养的表皮细胞中加入天疱疮抗体继续培养24h,细胞的整 体外观无明显变化，48?72h，细胞间隙渐增宽，细胞出现 松解和小水疱。由此奠定了天疱疮抗体在天疱疮发病中的重 要地位。 2抗原抗体的致病机制 Mori oka等认为天疱疮患者发生棘层松解可能通过角质 形成细胞释放蛋白酶，如纤溶酶原激活物，尤其是尿激酶型 纤溶酶原激活剂破坏细胞间的粘附作用，天疱疮抗体与抗原 的结合作为一信号，传递至细胞内部，角质形成细胞产生蛋 白溶解酶，被激活的蛋白酶溶解细胞间粘着性连接结构和细 胞粘附分子，使表皮细胞相互分离。McNEIll等证实表皮角 朊细胞表面有高亲和力的upA的受体［6］。而只有upA的受 体结合upA才有活性。落叶性天疱疮抗体与上棘层细胞结合 后，上棘层细胞分泌位于细胞膜上的upA，溶解细胞周围的 粘附分子，引起上棘层的棘层松解；同样，寻常性天疱疮引 起下棘层的棘层松解。角朊细胞还分泌纤溶酶原激活物抑制 剂。PAI在调节PA功能方面起重要作用，另外PA产生于角 朊细胞但不包含在溶酶体内，不会引起较为广泛的破坏。 近年来，钙离子在天疱疮发病机制中的作用受到许多学 者的重视。M emar等［7］在实验中发现天淹疮抗原可能通 过调节细胞内钙离子移动信号的改变诱导细胞内钙离子暂 时性的增加，随之角质形成细胞释放蛋白酶，进一步诱导水 疱形成，这种钙离子流可被天疱疮抗体的预吸附所抑制抗体 3天疱疮抗体Pab的检测 免疫荧光已成为诊断天疱疮的常用方法。临床常用间接 免疫荧光和直接免疫荧光。其最可靠的诊断依据是表皮细胞 间IgG和C3的沉积。Hela nder等对未经选择的黏膜标本进 行直接免疫荧光检查，发现直接免疫荧光对诊断天疮疱的价 值优于组织病理。天疱疮活动期IIF检测血清Pab阳性率更 高。IIF和DIF对照检查，发现DIF阳性率较IIF更高，且 持续时间较长，因此确定诊断时宜选用DIF。且发现天疱疮 活动期不同部位的“正常”皮肤DIF检测均为阳性，因而认 为不一定在皮损边缘部位取材，但是皮损边缘皮肤荧光抗体 稀释度较“正常”部位为高。另外，由于低滴度的天疱疮样 抗体的存在，国外学者定天疱疮抗体滴度1: 50以上为阳性， 国内一般定为1: 40以上。 Wils on等认为天疱疮皮损好发于头皮部，可能是由于 头皮部的靶抗原分布较多，因此检测患者头皮毛囊天疱疮抗 体的沉积情况，可能有助于天疱疮的诊断。李晓东等［8］ 用直接免疫荧光方法测定了 21例天疱疮患者拔出的头发上 残留毛囊中和皮损处天疱疮抗体的沉积，认为皮肤、毛发切 片和拔发直接染色三者的结果一致，但直接染色拔出毛发的 方法简单、快速的优点。 免疫印记技术是近20年发展起来的一项免疫学检测技 术，它不但特异性强且敏感性高，国外已用于PV抗体的检 测中。耿龙等［9］应用免疫印记技术检测天疱疮抗体，认 为其敏感性稍高于免疫荧光，为天疱疮的诊断提供重要的依 据。 随着检验技术的发展，抗独特型抗体已广泛应运于多种 自身免疫性疾病的诊断和实验性治疗。石磊等［10］用酶联 免疫吸附试验检测49例天疱疮患者，敏感性和特异性达80% 以上，高于免疫荧光，认为相对免疫荧光，酶联免疫吸附试 验是一种简便、敏感和特异性高的天疱疮血清学诊断方法， 并能辅助鉴别PV和PF。而免疫荧光需一定的仪器设备，在 基层医院较难开展，影响实验的因素较多，结果的判定有一 定的主观性；实验结果是一系列的抗体滴度，不能区分Dsgl、 Dsg3的特异性抗体。 4天疱疮抗体的临床意义 赵永铿等［11］在不同部位天疱疮抗体滴度的研究中发 现，皮损边缘部位直接免疫荧光阳性时抗体滴度较其他部位 “正常”皮肤滴度高，而皮损边缘的“正常”皮肤是皮损不 断向外扩展之处，说明抗原抗体反应迗到一定程度才会产生 皮损。 抗体对桥粒的影响：聂祝湘等［12］建立了棘层松解模 型，发