子宫内膜癌PTEN蛋白表达及其临床意义..docVIP

子宫内膜癌；免疫组化 【ABSTRACT 子宫内膜癌；免疫组化 【ABSTRACT 】 igatetheexpression ometrialcarc i nomaa ithclinicalfeature expressionsofPTENp hendometrialcarcin byimmunohistochemi sitiveexpressionra nendometrialcarcin 子宫内膜癌PTEN蛋白表达及其临床意义 【 】目的：探讨抑癌基因第10染色体同源丢失性 磷酸酶一张力蛋白基因（PTEN）蛋白表迗与子宫内膜癌的发 生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学S P法检测PTEN 蛋白在56例子宫内膜癌及30例正常子宫内膜组织的表迗。 结果:56例子宫内膜癌中PTEN蛋白表迗缺失率为571%，明显 高于正常子宫内膜中的完全表达（P【关键词】PTEN基因; 0 bjecctive：Toinvest ofPTENprotEininend nditsrelationshipw .Methods：Totestthe roteinof56caseswit omaand30nomalwomen stry.Results：Thepo tesofPTENwere429%i omaand100% i nnorma1 edometriun (P 【KEYWO RDS 】 Endometrialca rcinoma；PTEN；Immun ohistochemistry 第1 0染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因（PTEN） 是1997年发现的一种肿瘤抑制基因，在许多肿瘤中出现表达 缺失或突变。为研究PTEN与子宫内膜癌发病之间的关系，我 们采用免疫组化S P法检测子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的 表达及其与临床病理特征的关系，探讨其与子宫内膜癌发生、 发展、治疗及预后的相关性。 1资料与方法 11 一般资料河北北方学院附属第一医院XX8~XX5月 收治的资料完整的子宫内膜癌患者56例及正常子宫内膜30 例和非典型增生子宫内膜32例。年龄39~70岁，平均50岁。 按照子宫内膜癌的手术病理学分期其中I期30例，II期16 例，III期10例。病理分级中G128例；G220例；G38例。肌 层浸润＜1/2者43例，淋巴转移19例。患者术前均未行放 疗、化疗和激素治疗。 12方法采用免疫组化链霉素抗生素蛋白一过氧化 物酶法检测PTEN蛋白的表迗，PTEN基因多克隆抗体和S P 试剂盒均购于福州迈新生物技术公司，操作按S P试剂盒要 求进行，步骤如下：所有组织蜡块5 u m连续切片，65°C烘烤、 脱蜡，3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶15min，高压加热修 复抗原，10%的正常血清封闭，依次滴加一抗（PTEN羊多抗）、 二抗、链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶液，D A B显色lOmin, 苏木素复染，脱水，透明。中性树胶封片，显微镜下观察：阳性 对照为已知阳性的子宫内膜癌，用PBS液取代一抗做阴性对 昭。 MW o 13结果判定PTEN蛋白定位于细胞胞浆，呈棕黄色颗 粒，细胞核和细胞膜均不着色。在高倍镜下计数1000个细胞， 计算阳性细胞所占的百分比（5 0 %为++）。 14统计学处理采用SPSS100软件包进行x2检验及 F ishers精确检验（P2结果 PTEN在子宫内膜癌中的表迗PTEN在正常子宫内膜 中表达无缺失，子宫内膜癌中表迗缺失为571%，见表1。 PTEN在子宫内膜癌中的表达及临床病理特征PTEN 在子宫内膜癌中的表迗缺失与临床分期和病理分级有关，I /II期的表达缺失率明显高于PTEN III期（P3讨论 31 PTEN基因的结构及功能PTEN蛋白定位于胞浆，由 403个氨基酸组成，分子量为47 122U，主要结构功能区位于 N端，含有一个蛋白酪氨酸鱗酸酶催化区，与一个较长的张 力蛋白和辅助蛋白的同源区。目前认为，该基因是一抑癌基 因，其作用主要表现在以下几个方面：调控细胞周期，诱导细 胞凋亡，调节细胞迁移、浸润、整合素介导的细胞铺展及局 部粘附的形成等。PTEN的功能异常主要通过基因突变、基 同源性丢失、启动子甲基化、表达缺失等方式发生。其基因 变化中，以突变最为常见，主要为体细胞突变。另外，mRN A以及蛋白表达的异常也是失活的重要方式。 32 PTEN表达与子宫内膜癌的关系迄今为止，PTEN基 因与子宫内膜癌的确切关系尚未完全明了，该基因在子宫内 膜癌中的突变率为33%?55%[1]，是目前发现的子宫内膜癌中突变率最高的基因，而且子宫内膜癌也是迄今发现的PTEN 基因突变率最高的肿瘤。PTEN蛋白表达的缺失，是多种机制 引起PTEN基因功能丧失的表现，包括PTEN基因同源性丢失， 无义突变和启动子甲基化等［2］。