肠道病毒71型感染宿主固有免疫应答的研究进展.docVIP

肠道病毒71型感染宿主固有免疫应答的研究进展 　　摘要：肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）感染严重危害儿童生命安全。其致病机理尚未完全明确。EV71感染既可以激活模式识别受体诱导机体的固有免疫应答，病毒自身也进化出独特的机制逃避固有免疫的杀伤。此外，固有免疫应答也与EV71致病机理、临床特点密切相关。本文就以上方面的最新研究进展进行综述及讨论。 　　关键词：肠道病毒71；固有免疫；信号转导；Ⅰ型干扰素；细胞因子 　　肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是除脊髓灰质炎病毒外最重要的嗜神经型病毒之一。主要感染学龄前儿童，临床表现轻重不一，从轻微的手足口病或疱疹性咽峡炎，到无菌性脑膜炎、脑炎、肺水肿和死亡[1]，目前尚无有效的药物和预防手段。EV71引起疾病不同临床表现的机制至今尚不清楚，推测与EV71感染导致异常的免疫反应有关。动物机体对病毒感染的免疫应答分为固有免疫应答和适应性免疫应答两个层次。其中，固有免疫应答不但是机体抵抗病毒侵染的第一道防线，而且负责启动和调节机体适应性免疫，在整个抗病毒免疫反应中发挥着十分重要的作用[2]。现就EV71感染宿主固有免疫应答的研究进展综述如下。 　　1 固有免疫与病毒感染 　　固有免疫也称天然免疫，是宿主防御病原体入侵的首道屏障。主要通过胚系编码的模式识别受体（PRRs）识别病原微生物保守的相关分子模式（PAMPs），实现对外来病原体的早期识别，进而启动固有免疫的效应机制。病原体入侵宿主，PRRs迅速激活，通过特异的信号级联反应活化转录蛋白，从而诱导靶基因、促炎细胞因子、Ⅰ型干扰素（Ⅰ型IFN，INF-α/β）等的表达，诱导感染部位产生炎症反应，吸引并激活巨噬细胞（MC）和树状突细胞（dDCs）等免疫细胞，从而清除病原微生物；同时上调抗原递呈细胞（APC）表面共刺激分子的表达，诱导T或B淋巴细胞活化、增殖、分化为效应T或B细胞，产生病原特异性的适应性免疫应答[3]。固有免疫和适应性免疫在感染的各个阶段协同作用，最终清除入侵的病原微生物。 　　病毒释放的PAMPs主要是核酸类物质，包括病毒基因组DNA、单链RNA（ssRNA）、双链RNA（dsRNA）、5三磷酸RNA和表面糖蛋白等[3]。宿主PRRs主要有四类[4]：Toll样受体家族（TLRs）、RIG-Ⅰ样解旋酶受体家族（RLRs）、核苷酸结合寡聚化结构域样受体（NLRs）的一些成员，以及ERIS（STING/MITA）等蛋白质。PRRs分布在不同类型的细胞，不同的PRRs识别不同的PAMPs，并具有细胞特异性，激活不同的信号通路[5]。 　　已知哺乳动物有13种TLRs，表达在DCs、MC、淋巴细胞及其他细胞。TLR3、TLR7、TLR8、TLR9主要识别病毒DNA及RNA成分，TLR2、TLR4识别病毒糖蛋白[3]。RLRs有三个成员：视磺酸诱导基因蛋白Ⅰ（RIG-Ⅰ，DDX58，DEAD）、黑色素瘤分化相关基因5（MDA5、IFIH1）和遗传学和生理实验室蛋白2（LGP2），RLRs在包括免疫细胞和非免疫细胞表达，可以识别细胞内RNA病毒成分[3]。另外两类PRRs主要识别细胞内DNA[4]。 　　2 EV71感染的固有免疫识别 　　体外和动物研究的结果表明，小RNA病毒EV71与其他家族成员一样，通常由TLRs与RLRs识别其核酸[3]。Gong X等[6]经RT-PCR证实，感染EV71的人单核细胞源巨噬细胞（MDMs），TLR2、TLR7和TLR8的表达显著增强，增强的IL-8和TLR2基因表达也在紫外线失活EV71感染的MDMs发现，分析很可能是细胞表面上的TLR2和病毒蛋白相互作用的结果，认为TLR2，TLR7和（或）TLR8参与了EV71相关分子模式的识别。虽未直接检测到TLR3表达增加，但另一研究观察到感染细胞中TLR3信号通路的关键转录因子干扰素调节因子3（IRF3）下调和干扰素刺激基因（ISG）磷酸化抑制，表明EV71和TLR3之间有关联[7]。另外，EV71 3C蛋白酶（3Cpro）与RIG-Ⅰ相互作用，随后破坏RIG-Ⅰ依赖的Ⅰ型IFN反应所需的RIG-Ⅰ-IPS-1复合体[8]，提示RIG-Ⅰ途径可能参与识别EV71。最近，Kuo RL等[9]使用EV71 RNA作为激动剂，在基因敲除实验中显示MAD5表达减少，IRF3的活化与IFN-βmRNA表达相应降低，表明MDA5参与了EV71的PAMP识别。 　　PRRs基因的多态性也可能是EV71感染的危险因素。有国内的学者[10]检测了87例有症状的EV71患者与57例无症状EV71感染对照组TLR3、RIG-Ⅰ以及MDA5的基因多态性，有序Logistic回归分析显示MDA5（rs1990760）