单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体ORF2的表达及其抗凋亡.PDFVIP

微生物学通报 MAR 20, 2010, 37(3): 389393 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 单纯疱疹病毒 2 型潜伏相关转录体 ORF2 的 表达及其抗凋亡作用 杨慧兰1* 白利利1,2 (1. 广州军区广州总医院皮肤科 广东 广州 510010) (2. 华南理工大学生物科学与工程学院 广东 广州 510006) 摘 要: 本文探讨了单纯疱疹病毒2 型 (HSV-2)潜伏相关转录体 (LAT) 的开放读码框2 (ORF2)在细 胞中的表达, 及其对5- 氟尿嘧啶 (5-FU)诱导的非洲绿猴肾细胞 (Vero) 凋亡的影响。通过将重组质粒 pEGPF-ORF2 转染Vero 细胞, 绿色荧光蛋白检测转染效率, RT-PCR 验证目的基因的表达, 5-FU 诱导 细胞凋亡, 通过荧光显微镜观察凋亡小体, Gimesa 染色检测细胞核形态, MTT 法检测细胞的存活率, DNA ladder 片段分析, 结果表明, 转染后绿色荧光蛋白表达效率很高, RT-PCR 验证有目的基因的转 录。凋亡诱导后的细胞形态正常, MTT 法分析活性率与正常无差异, 而显著高于空质粒组, DNA ladder 未见凋亡条带。由此我们认为HSV-2 LAT ORF2 基因在Vero 细胞中得到了高效表达, 并且具 有抗5-FU 诱导的凋亡作用。 关键词: 单纯疱疹病毒, 潜伏相关转录体, 绿色荧光蛋白, Vero 细胞, 抗凋亡 The Expression and Anti-apoptotic Function of HSV-2 LAT ORF2 YANG Hui-Lan1* BAI Li-Li1,2 (1. Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command, Dermatology, Guangzhou, Guangdong 510010, China) (2. South China University of Technology, Biological Science and Engineering School, Guangzhou, Guangdong 510006, China) Abstract: To explore the expression and effects of transfection of the HSV-2 LAT ORF2 gene on Vero cells against apoptosis induced by 5-FU. Recombinant plasmid pEGFP-ORF2 was transiently transfected into vero cells, expression was determined by green fluorescent protein and RT-PCR, changes of cell apopt