花生四烯酸对三角褐指藻生长脂质含量及相关基因表达的-核农学报.PDFVIP

核 农 学 报　 ２０１８，３２（７）：１２９１～１２９７ １２９１ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ 文章编号：１０００⁃８５５１（２０１８）０７⁃１２９１⁃０７ 花生四烯酸对三角褐指藻生长、脂质含量 及相关基因表达的影响 ∗ 周丽亚　 龚一富 　 俞　 凯　 陈俊粤　 王何瑜　 章　 丽　 严小军 （宁波大学海洋学院／ 教育部应用海洋生物技术重点实验室，浙江 宁波　 ３１５２１１） 摘　 要：为提高三角褐指藻生产生物柴油的能力，本研究利用不同浓度（０、０５、２５、１２５、６２５ 和３１２５ －１ ｍｇ·Ｌ ）的花生四烯酸（ＡＡ）处理三角褐指藻，探究三角褐指藻生长、总脂、游离脂肪酸的变化，并通过 荧光定量 ＰＣＲ 研究脂质生物合成途径中相关基因的转录差异。 结果表明，低浓度（０１ ～ ６２５ －１ －１ ｍｇ·Ｌ ）的ＡＡ对三角褐指藻的生长有促进作用，高浓度（３１２５ ｍｇ·Ｌ ）则抑制其生长。 游离脂肪酸 －１ 与总脂含量结果表明，游离脂肪酸在ＡＡ 浓度为１２５ ｍｇ·Ｌ 时达到最大值，较对照组提高了４倍；总脂 －１ 则在ＡＡ 浓度为６２５ ｍｇ·Ｌ 达到最大值，较对照组提高了５４％。 荧光定量ＰＣＲ分析结果表明，在ＡＡ －１ 浓度为３１２５ ｍｇ·Ｌ 时，油脂合成相关基因ＬＰＡＡＴ、ＧＰＡＴ、ＫＡＳ ＩＩ、ＡＣＣａｓｅ 转录水平与对照组相比极显 著提高（Ｐ＜００１）。 综上，ＡＡ促进三角褐指藻油脂的积累可能是通过增加油脂生物合成相关基因表达 来实现的。 本研究结果为利用基因工程实现微藻油脂的能源化目的奠定了理论基础。 关键词：花生四烯酸；三角褐指藻；生长；脂质；基因表达 ＤＯＩ：１０１１８６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１２０１８０７１２９１ 　 　 随着化石燃料的资源枯竭和其带来的气候变化问 的生长速率及其脂质含量相关。 题日益严重，开发可再生能源取代化石燃料迫在眉 花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ ａｃｉｄ，ＡＡ）是一种可促进 ［１］ ［１５］ 睫 。 微藻是生产天然油脂、蛋白质、类胡萝 卜素、色 植物细胞中代谢产物合成的非生物诱导子 。 Ｗａｎｇ ［２］ ［１６］ 素等物质的原料之一 。 研究发现微藻还可用于生 等 关于雨生红球藻的研究表明，ＡＡ可通过增强ｄｘｓ 产生物柴油［３－４］ ，但相关技术还有待突破。 前人研究 ［１７］ 基因的表达促进虾青素的积累。 马颖瑞等 和周静 表明，在有利条件下，三角褐指藻（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ［１８］ 等 研究发现，ＡＡ