国家自然基金标书- 肿瘤干细胞的动态演进及干预研究.doc

项目名称： 肿瘤干细胞的动态演进及干预研究 首席科学家： 刘强 中山大学 起止年限： 2012.1至2016.8 依托部门： 教育部  一、关键科学问题及研究内容 拟解决的关键科学问题： 肿瘤干细胞的动态演进及干预研究。本项目将围绕“肿瘤干细胞的动态演进及干预研究”这一关键科学问题，选择造血和消化系统恶性肿瘤为研究对象，以肿瘤干细胞动态演进过程为切入点，通过体内外功能实验及临床标本验证“干性”及转移潜能调控中的关键基因，明确肿瘤干细胞演进的分子机制、关键调控分子和信号通路，探索靶向肿瘤干细胞演进过程的干预方法和手段，阐明肿瘤干细胞的演进过程及靶向干预肿瘤细胞动态演进过程的干预新模式。本研究将为肿瘤干细胞的动态演进模型及创新性靶标药物的临床应用提供充实的理论和实验依据，为攻克肿瘤开创新的突破口。 围绕拟解决的关键科学问题，本项目的主要研究内容是： 1. 肿瘤干细胞的起始与动态演进机制：本课题组将运用TEL-AML1及PML-RARα白血病相关模型，探索白血病干细胞的动态演进过程（白血病起源细胞→白血病前癌干细胞→白血病干细胞）：（1）TEL-AML1 相关白血病起始和发展过程中起源细胞、Pre-LSC和LSC的鉴定，以及这些干细胞动态演进的遗传和表观遗传调控机制；（2）PML-RARα相关白血病起始和发展过程中不同阶段的干细胞鉴定和动态演进机制。另一方面，本课题组还将探讨肝癌干细胞在肝癌发生发展过程（原发、复发及转移）中的动态演进过程。 2. 肿瘤干细胞“干性”的分子调控及临床意义：（1）应用新一代高通量测序技术，系统分析全基因组、全外显子组、转录组、表观遗传组、代谢组等变化，绘制造血和消化系统肿瘤干细胞异质性相关基因序列谱、表达谱和表观遗传学图谱，分析肿瘤干细胞“干性”相关的调控分子及关键信号通路；（2）运用小鼠模型等体内外功能实验对候选分子在肿瘤干细胞动态演进过程中的功能进行鉴定，并通过临床标本检验肿瘤干细胞动态演进模型的临床意义；（3）结合本课题组已有工作基础，展开肿瘤干细胞细胞周期、非对称分裂等分子调控方面的细致研究。 3. 肿瘤干细胞转移潜能获得的分子机制：肿瘤干细胞的“干性”决定着其转移潜能，EMT作为肿瘤转移的重要机制，与肿瘤干细胞的动态演进过程紧密关联，剖析二者之间的相互作用，将为寻找肿瘤发生及转移的靶点提供有力的理论基础：（1）利用肝癌转移动物模型，研究具有转移潜能的肿瘤干细胞的基因表达谱；（2）研究本课题初期筛选到的调节肿瘤干细胞“干性”相关基因促进EMT过程的可能性及机制；（3）在已有研究基础上，继续探索细胞增殖相关基因调节EMT及肿瘤干细胞生物学行为的机制；（4）结合临床标本研究EMT相关基因在转移性肝癌等消化系统恶性肿瘤的相关性。 4. 肿瘤干细胞的特异性干预靶点研究：针对肿瘤干细胞动态演进过程以及与“干性”、转移潜能相关的关键调控分子为靶点，建立特异性的干预手段：（1）结合本研究前期工作进展，针对肿瘤干细胞演化过程中关键分子和通路的遗传学和表观遗传学学改变，寻找可干预的靶点，设计特异性抑制分子；（2）深入探讨AKT抑制剂、XIAP抑制剂等在体内外对肿瘤干细胞增殖、抑制和凋亡的诱导作用，及相关下游信号通路的抗肿瘤分子机制；（3）研究肿瘤干细胞对细胞凋亡抵抗的新分子机制，在此基础上设计和筛选对肿瘤细胞和肿瘤干细胞具有更高促凋亡作用的靶向性凋亡诱导剂和增敏剂，研发新的抗肿瘤药物；（4）针对肿瘤干细胞的代谢调控机制，建立肿瘤干细胞代谢组学研究平台，开发具有临床应用前景的代谢靶向新药。  二、预期目标 恶性肿瘤是危害人类健康的常见病，肿瘤干细胞作为肿瘤组织存在的根源，在肿瘤的诊断与治疗中有着举足轻重的地位，本研究将充分利用国内丰富的肿瘤资源，发挥各合作单位的高水平人才和完善的实验平台，探索“肿瘤干细胞的动态演进及干预”。本研究以严重危害国民健康的血液和消化系统肿瘤为研究目标，在前期成功分离鉴定血液和消化系统肿瘤干细胞的基础上，充分利用新一代高通量测序平台，系统研究肿瘤干细胞动态演进过程及遗传学和表观遗传学的变化，成功筛选“干性”与转移潜能调控通路中的关键分子，通过体内外功能学实验的鉴定及临床标本的验证，进一步探讨其作为特异性干预靶点的潜在意义，开发系列药物来靶向肿瘤干细胞的动态演进过程，制定以肿瘤干细胞为靶标的分子干预策略，引领肿瘤干细胞研究领域的前沿。 具体预期目标如下： 1. 阐明肿瘤干细胞的动态演进模型：发展前期研究成果，通过研究干细胞在白血病及肝癌中的起始和演化过程，阐明并完善肿瘤干细胞的动态演进模型（肿瘤起源细胞→前体肿瘤干细胞→肿瘤干细胞），及致瘤和非致瘤性肿瘤干细胞之间的互相演变，明确其重要调控机制，将引领肿瘤干细胞研究的国际前沿。 2.完善全基因组水平肿瘤干细胞遗传学和表观遗传学