TT病毒的研究近况　.docVIP

TT病毒的研宄近况 关键字：TT病毒 1997年12月，日本学者报道在输血后不明病因肝炎病 人中发现了 一种DNA病毒，并将之命名为TT病毒 (transfusion-transmittedvirus ’ TTV)’ 初步研宄表明， TTV与转氨酶异常有密切关系，可能是一种新的输血后非甲 -戊型肝炎的致病病原［1］。本文就TTV的致病性、分子生 物学特性及初步流行病学研究等作一概述。 病毒的发现 虽然有敏感、特异的实验方法检测已知的甲、乙、丙、 丁和戊型肝炎病毒感染，但仍有10%?20%的病毒性肝炎用 现有的方法不能分型，大量的临床研究发现，在急慢性输 血后肝炎，散发性肝炎和暴发型肝炎病例中，相当数量的 肝炎病人病原不明，提示还存在其它的病毒因子［2，3］。 1995年，美国两个实验小组相继发现可引起肝为的病毒GG V-C和HGV，经分子克隆和序列分析证实，GGV-C和HGV均 为正链单股RNA病毒’基因全长?’编码2900左右个氨基 酸，属黄病毒科病毒。二者在核苷酸和氨基酸水平的同源 性分别为8 5 %和95%，故认为是同一种病毒不同的分离株， 统称为庚型肝炎毒［］。庚型肝炎病毒可经输血传播，正常 人群有1 %?2%的感染率。但庚型肝炎病毒在输血后不明病 因肝炎、非甲-非戊型肝炎中检出率仅为%?15%，尚有7 0% 左右非甲-非戊型肝炎、暴发型肝炎病因仍不明［6］，促使 人们继续研究寻找某种新的病原因子。 199 7年底，日要一个从事非甲-戊型肝炎研究的小组， 采用代表性差异分析技术(RDA)，从1例心脏手术接受输 血引起不明病原转氨酶升高病人血清中分离出一病毒基因 克隆(N2 2)。经测序显示，该病毒基因片段长50 0 bp，两 端有sau3 A1酶切位点序列(GA TC)。有一个能编码1 66个 氨基酸的开放读码杠(0RF)。经与DD BJ基因序列数据库中 1 ’ 731。75 2个序列比较，未发现有同原序列，证实是一 种新的病毒基因序列［1］。为了解该病毒基因特性，将其反 转成cDNA，用设计的引物进行PCR扩境，发现病毒基因本 身及其cDN A均能扩增出同样大小的条带；同时用人淋巴细 胞和胎盘组织提取的模板，则未能扩增出条带，证明N22为 非宿主本身来源的DNA病毒。并将之命名为TT病毒(TTV)。 之后，研究者又从1名无任何症状献血员血清标本中获得1 株TTV(T A 278) ［7］,对该株TTV基因全序列进行了分析显 示，TTV是单股DNA病毒，病毒基全长约，与某些动物单链 D NA病毒有相似之处。T TV与输血后不明病因转氨酶升高 有密切关系，可能是输血后肝炎病因之一。 的特征 理化特性［7］采用蔗糖密梯度离心方法发现，TTV位于/ cm3处’与HBV有相似大小的标志(/cm3 )。经用叶温80处 理，TTV仍聚集在/c m3位置，说明TTV不含有包膜，不能 被吐温消化。但至今尚未分离出TT病毒颗粒。 基因结构□为了研究TTV核酸特点’日本研究人员从 —份含高度TTV的血浆中提取病毒核酸’用几种不同的核 酸酶消人’然后再进行PCR扩增’结果发现TTV核酸对Dna se i、MungBe an核酸酶(单链DN A的特异性消化酶)敏感， 对Rn aseA不敏感。从血浆提取的T TVdNA不被限制性内切 酶Ndel消化。为了进一步了解TT V DNA特性，对来源于转 化大肠杆菌及M13质粒的双链和单链TTVd NA进行酶处理， 结果双链TTVDNA对M un gBean核酸酶不敏感，而对限制性 内切酶Nd el敏感。单链TTVd NA则相反。根据这些结果得 出T TV核酸是单链DNA。目前尚无充分证据表明TTV是线 形或环状DNA病毒。 随后，研宄人员又从一名无任何症状献血员血中分离 到1株TTV病毒(TA2 78)，并进行了全基因序列分析。TA 278株TTVdNA由3739 bp组成，其中碱基A占1163 (31%), C 占 95 4 (26%) G 占84 2 (23%)，T 占7 80 (21%)。病毒基 因组上有2个开放读码杠(ORF), 0RF1位于核苷酸589?2 8 98的位置，0RF 2位于核苷酸107?712位置。两个OR F 分别编码770和2 02个氨基酸。另外，在病毒基因组上还 发现2个ORFs.。分别位于核苷酸45?34 4和372?686位 置，编码100和10 5个氨基酸，但在互补序列上未发现有 能编码大于100氨基酸的ORF S .在ORFIN7末端富含具有高 度亲水性的精氨酸。在TTV基因组中，多聚腺苷酸信号 (AAT AAA)及TATA序列多次重复出现。TTV基因结构与某 些动物单链D NA病毒(圆环病毒科、线状细小病毒科)有 相似之处。基因型及亚型［1，7?9］从已报道的T