P－１P－L１在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义.docVIP

PD- 1 PD-L1在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义 翁珊珊郑翠苹(通讯 )吴圣豪胡型忠范玉芳温州市中心医院(温州医 科大学定理临床学院)血液化疗科浙江温州 3 2 5 0 0 0木课题受浙江 省公益性技术应用研究项目(编号:2 0 1 4 C 3 3 1 5 9)资助木课题无经济利 益冲突 】目的探讨PD- 1 /PD-L1在多发性骨髓瘤中的表达及临床意 义.方法釆用流式细胞术检测初治MM治疗前后及健康体检者外周血T细胞 表面PD-1的表达，并对其与MM的临床分期及临床疗效进行相关性分析.结果 ①初沿MM外周血T细胞上PD — 1的表达较健康体检者高，.目.治疗后明显下降, 差异有统计学意义(P 0.0 5 );?PD — 1的表达水平与疾病分期呈正相关，与临 床疗效呈负相关，差异有统计学意义(P 0.05 ).结论 PD- 1 /PDL1信号途 径可能参与了 MM的免疫逃逸及恶性增殖，有望成为MM免疫治疗的新靶点及 预后指标. 关键词】多发性骨髓瘤；PD- 1;免疫治疗 】R 7 3 3. 3 】A 】1 0 08 — 63 1 5 ( 2 0 1 5)1 0 — 0 0 5 2 — 02 多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是造血系统恶性克隆性疾病，其发病率 居血液系统恶性肿瘤第二位，传统化疗方法完全缓解率不高，中位生存期只有2 — 2. 5年[1 ].其原因之一可能为骨髓瘤细胞通过某种机制逃避机体的免疫监视和 杀伤.导致MM免疫功能紊乱的一个因素是程序性死亡一 1 (proGcesseddeath — 1 ,PD-1 的蛋白质.PD — 1是B7家族的一个具有抑制作用的共刺激分子，主要 表达于活化的T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞表面，在T(细胞的激活和耐受 中起了关键作用[2 ].其配体为程序性死亡分子1配体一1 Programmeddeath 1 -ligand,PD-L1 )[ 3 ].二者结合后，由PD — 1传递负性调控信号诱导肿瘤抗原特 异性T细胞的凋亡和免疫无能,促使肿瘤的免疫逃逸[4 一 6].由此可推测，可通 过细胞免疫水平的干预为抗骨髓瘤免疫治疗方案的实施提供基础,但是逆转骨髓 瘤相关的免疫仍然面临严峻的挑战［7］.本研究报道了 PD- 1在初治多发性骨髓 瘤中的表达,并探讨其临床意义. 1 资料与方法1 . 1 资料选取2 0 1 3年1 0月至2 0 1 5年3月我 院收治的3 0例初发MM患者，年龄3 8 - 7 8岁，中位年龄6 5岁；I期3例， II期1 6例JII期1 1例［依据MM国际临床分期系统（ISS）L其诊断标准及疗效评 价统-参照?中国多发性骨髓瘤诊治指南?及国外诊断及疗效评价标准.所奋患者 要接受的治疗方案为含硼替佐米的BCD方案（（硼替佐米1 . 0 — 1 . 3 mg/m 2 d ,d 4 ,d 8 ,d 1 1 ;环磷酰胺0 . 3 g/m 2，每疗程的d 1、d 1 1静脉注射;地塞米松 0 mg/d,每疗程的第1 一 2天、第4 一 5天、第8 — 9天及第1 1 一 1 2天静 脉滴注，每2 8d为1个疗程，根据患者年龄、一般状况、重要脏器功能等,适当调 整药物剂量）化疗4个疗程.患者年龄、性别等一般情况具冇可比性，差异无统计学 意义（P〉0. 0 5）.所有入选患者在研宄前7 d未接受任何治疗.健康志愿者来 自我院体检人员1 5例，均无肿瘤、外伤、感染、传染病及自身免疫性疾病史，其 中男性9例，女性6例，年龄4 0 - 6 5岁，中位年龄5 0岁.本研究获得医院伦理 委员会批准，所有入选患者均签署知情同意书和治疗同意书.1 . 2 主要仪器及 试剂 CD 8 -PECY7、CD 4 PECY 5、CD 4 5 RAFITC、CD 2 7 APC、PD— 1 —PE 及 相匹配的对照抗体、PBS（HyCIOne）分离洗涤液均购自BD公司;溶血剂（溶血素：蒸 馏水=1 : 9实验室自制）;流式细胞仪FACSCalibur购自美国BD公司.釆用 flowjo流式分析软件对结果进行数据分析. 1.3 方法1.31 PD- 1的测定抽取初治MM患者及健康体检者 外周静脉血，肝素抗凝,用溶血素对标本进行溶血分离淋巴细胞,PBS洗1次，加入 CD 4 /CD 8、CD 4 5 RA、CD 2 7和PD- 1表面分子抗体，室温避光染色2 0 min, 离心弃上清，细胞用PBS洗涤2次,悬浮于5 0 0 mu;IPBS中,室温避光保存.用流 式细胞仪分析，获取细胞数不少于5 0 0 0 0个，并用flowjo流式分析软件对结果 进行分析.1.32 治疗后PD- 1的测定在患者接受化疗4个周期后,抽取患 者外周血,肝素抗凝备用.操作方法及流程同上.