冷冻电子显微学.PDFVIP

科技导报2017，35（23） 冷冻电子显微学冷冻电子显微学 ———度诺贝尔化学奖成果简析年度诺贝尔化学奖成果简析 王宏伟 清华大学生命科学学院；北京结构生物学高精尖创新中心，北京 100084 摘要摘要 2017年诺贝尔化学奖授予JacquesDubochet，JoachimFrank和RichardHenderson3位科学家，以表彰他们在发展利 用冷冻电子显微学技术解析溶液中生物大分子高分辨率结构方面做出的开创性贡献。本文评述冷冻电子显微学的发展历程、生 物大分子三维重构技术的发展、最近导致冷冻电子显微学迅速崛起的技术突破以及该技术未来的发展趋势。 关键词关键词 2017年诺贝尔化学奖；冷冻电子显微学；三维重构；生物大分子结构 2017年10月4 日，诺贝尔化学奖评奖委员会宣布，将 显微镜内部运动。根据高速运动的电子在磁场中发生偏转 2017年的诺贝尔化学奖授予3位科学家，表彰他们在发展利 的原理，透射电子显微镜中的一系列电磁透镜对电子进行汇 用冷冻电子显微学技术解析溶液中生物大分子高分辨率结 聚，并对穿透样品过程中与样品发生相互作用的电子进行聚 构方面做出的开创性贡献。这3位科学家分别是瑞士洛桑大 焦成像以及放大，最后在记录介质上形成样品放大几千倍至 学教授JacquesDubochet，美国哥伦比亚大学教授Joachim 几十万倍的图像，从而获得样品的精细结构信息。 Frank以及英国MRC分子生物学实验室教授RichardHender⁃ 应用透射电子显微镜观察生物样品需要克服3个技术难 [4] son。 点 ：1）高真空的显微镜内部环境与生物样品在水化环境中 的矛盾；2）生物样品主要由轻元素组成，易于受到高能电子 1 冷冻电子显微学的发展历程 的辐照损伤；3）生物样品的轻元素组成与电子的相互作用较 “Seeingisbelieving”。自从列文虎克发明光学显微镜以 弱，导致成像的衬度低。在20世纪中叶，生物学家开发了一 来，人类可以观察生命体的微观结构，并促成了一系列生物 系列技术来绕过上述问题，通过对生物样品进行固定、包埋、 学中的重要发现。现代生物学的研究对微观精细结构的观 切片以及重金属染色等过程，使得应用透射电子显微镜观察 察提出了更高的要求。这是因为，生物体的各种生命活动的 细胞精细结构成为可能，并因此发现了许多重要的细胞器， 机制是由其组成成分之间的空间关系与变化情况决定的；对 如叶绿体、高尔基体、线粒体、核糖体、内质网、细胞膜、中心 于细胞及生物大分子结构的认识和理解能够让研究者们对 体和细胞骨架等。但这样制备的生物样品都是处于脱水状 生命过程有更深层次的认知。因而，对细胞结构及生物大分 态的，是对附着于生物大分子表面的重金属染料成像，而不 子的精细结构的揭示，已经成为现代生物学发展的本质需求 是对生物大分子的直接成像，因此无法保持和获得生物样品 以及主要推动力。 中的生物大分子高分辨率结构信息。 光学显微镜受限于可见光波长的衍射极限，能够实现的 如何在透射电子显微镜内观察含水状态的生物