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浅述桉树组培技术 　　摘要：本文主要介绍了桉树组培的诱导技术、组培继代苗及生根苗的管理技术，以及组培车间的管理技术，对于组培生产工作，有一定的指导意义。 　　 　　关键词：桉树；组培；技术 　　中图分类号：S73 文献标识码：A 　　前言：桉树是世界著名的速生丰产用材树种。我国引种桉树已经有120年的历史，是广西、广东、海南等华南各省的最主要造林树种，可在平原、台地、丘陵、低山等地貌的林地种植，是近年来发展速度较快的树种。并且，桉树具有较高的经济价值和广泛的用途，它是造纸原料的重要来源，它的木材还可以加工成家具，不但质量好，而且十分美观。而桉树组培的成功，主要解决了一些难以生根的树种或无法采用扦插方法增繁无性系的繁殖问题，加快优良无性系的繁殖速度，桉树组培苗的生产前景非常广阔。 　　1、组培设备 　　桉树组织培养是一项技术性很强的工作，无菌条件要求严格，对实验室设备及人员的操作技术要求较高，组培实验室应配备下列设备。 　　第一、洗涤设备：设置洗涤室、洗涤剂及各种洗涤工具。 　　第二、灭菌设备：设置高压高温灭菌锅。 　　第三、化学实验设备：设置实验台架、药品柜、冰箱、天平、各种、玻璃器皿、PH计、搅拌器等。 　　第四、无菌操作设备：设置接种室、超净工作台、镊子、剪刀、解剖刀及酒精灯等。 　　第五、培养设备：设置培养室、培养容器、三角瓶、罐头瓶等。 　　2、培养基及其附加成分 　　植物组织培养应用的培养基，一般都包括大量元素、微量元素和碳水化合物，并添加各种各样的附加物，如维生素、氨基酸、生长素、细胞分裂素等。 　　桉树芽的诱导可选用N6和MS等作基本培养基、胚状体的诱导可选用B5H及改良H等作基本培养基。 　　3、桉树无性系无菌材料诱导技术 　　目前，桉树无性系组织多采用外植体直接诱导腋生丛生芽，然后切取足够长度，长得健壮的小芽转到生根诱导培养基中，形成生根植株。采用这种方法，桉树的遗传性最稳定。 　　 (1)外植体的采集 　　采集对象为桉树嫁接苗或伐桩、环割、萌芽条。截取具有半木质化程度的嫩梢，长度为5~10cm。试验证明，3~5月份桉树萌芽率较高，茎部积累有较丰富的营养物质和内源激素，受病虫侵害较少、外植体诱导成功率最高。7~9月份属高温高湿季节，水分、温度都较高，病虫十分活跃，茎段机械损伤较多，易受病、虫菌的侵害污染，故诱导成功率最低。因此外植体采集最好是在春季进行，以芽条腋芽开始膨大，芽鳞片还未裂开时为最佳时机。芽条在植株上的部位也是诱导芽能否成功的重要因素。试验证明，萌芽条中上部的茎段，以半木质化的茎段第5~第7节最好，因为较易进行表面灭菌处理，而且不容易褐化，萌芽率也高；过嫩的芽木质化程度低，表面灭菌很容易被杀死；过老的茎段表面灭菌时容易褐化而死亡，而且过老的茎段再生能力差而不易萌芽。 　　(2)外植体消毒 　　将采回的桉树嫩茎段剪去叶片，用少量洗衣粉水漂洗10分钟，再用流动水冲洗半小时左右，然后在无菌条件下用75%酒精浸泡5秒钟，再用新洁尔灭溶液或0.1﹪升汞溶液浸5~6分钟消毒，用无菌水冲洗4~5次，然后切取含1~2个腋芽的茎段接种在培养基上进行诱导培养，试验证明，重复消毒一次效果更佳。 　　(3)褐变及其预防 　　桉树茎段接种后，如切口处产生褐色渗出物，使茎段周围的培养基变成棕褐色，这种现象就叫“褐变”。茎段在培养基内变褐色就会失去生命力，导致外植体死亡、严重地影响了外植体诱导的成功率，可采取以下措施综合防治。①.尽量避免组织伤害，用于切割的解剖刀应尽可能锋利。②切割外植体时，应当把组织浸于水中隔绝空气，同时，切面要垂直，切口的损伤要减至最低的限度。③接种时应选择表面消毒过程中没有损伤的茎段，并注意不让腋芽附着培养基。④利用漫射光培养。由于光能提高多氧化酶的活性，从而促进多酚化合物的氧化，因此在弱光下培养，能有效地降低多酚氧化物的氧化。⑤及时转移培养基，当发生褐变时应及时转移培养基，使褐化不影响腋芽周围的组织，外植体仍有萌动的生命力。 　　4、继代苗的增殖培养技术 　　继代苗的增殖培养是指将诱导形成的胚状体、芽丛等转接入培养基内，使其产生更多的芽体。 　　(1)继代苗的培养条件及方法：将诱导出的芽体转接到继代苗培养基里，然后放置于培养室内，室温为25℃——28℃为宜，光照强度为1500——3000LX为佳。过强的光照易使苗木老化，过弱的光照易使苗木徒长，所以控制好光照很重要。经过了七天左右的暗培养，即可见萌生出多丛嫩芽，经过1——2天的自然光照后，即可开日光灯增强光照。若发现霉菌及真菌感染的苗，要及时拿去高温消毒，以免传染了其他的瓶苗。 　　(2)继代培养容易遇到的问题及解决的办法：①玻璃苗：是指由于苗木不能及时见光，苗木木质化低。表现为叶片及嫩梢呈现出透