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金针菇杂合菌株子实体颜色遗传剖析 　　摘要：将可以单核出菇的黄色单核体与不同白色单核体配对杂交获得双核体，通过控制栽培条件和环境，观察不同组合杂交菌株在相同环境中的子实体的颜色，同时测量双核子实体菌柄基部深色部分占整个菌柄的比例，结果发现不同的黄色单核和同样白色单核组成的双核子实体颜色表达中存在着差异，且不同的白色核对颜色表达的贡献不同，证实了白色金针菇单核体中也存在着不同的等位基因，金针菇双核子实体的颜色受到两个亲本核的共同调控。?? 　　关键词：子实体颜色；?A颜色控制因子；?A金针菇?? 　　中图分类号：S646.150.1?ξ南妆晔堵耄?A 　　 　　在金针菇菌株中，有的表现野生型的黄褐色子实体、有的为突变的纯白色子实体、还有各种浅黄子实体。谢宝贵等人的研究表明[1]，金针菇的菇体颜色受一对等位基因(WY)控制，黄色(Y)为显性，白色(W)为隐性，黄色单核和白色单核杂交得到的杂合体后代，菇体表现浅黄色。之前笔者在对金针菇单核体的出菇研究中，观察到不同基因型的黄色单核子实体在菌盖和菌柄的颜色系列和颜色分布上存在着一定的差异，从而证实了子实体的黄色控制因子中存在不同的等位基因[2]。但是这些等位基因对双核体的子实体颜色表达存在怎样的影响、不同的白色核之间的颜色控制因子是否相同等问题尚待进一步研究。本实验通过控制菌丝生长条件和出菇环境，观察不同黄白单核的杂交组合在环境一致的条件下子实体的颜色，进一步研究了具有不同颜色控制因子的黄色单核在双核子实体颜色表达中的差异,以及不同白色核对颜色表达的影响。?? 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1??供试菌株 　　供试的黄色单核和白色单核菌株均通过采用双核菌株的原生质体单核化获得，其颜色特征通过单核出菇和杂交出菇进行验证，其中1521-4，1521-7，1583-8，1582-6和1528-11为黄色单核菌株[2]，1528-21，1514-11，1514-2，1572-2，2153-1，1533-1和1555-1为白色单核菌株。?? 　　1.2?λ?核菌株出菇培养料 　　木屑85％，麸皮15％，水1.4倍。?? 　　1.3??黄色单核和白色单核菌株的杂交 　　对所有黄色和白色单核体进行相互组合杂交，将活化后的黄色单核体菌株和白色单核体菌株同时接种于直径9 cm的PDA平板，两接种块间相距0.5～1 cm，24 ℃培养3～5 d，挖取0.5×0.5 cm2的配对单核体菌落交汇处培养物，转接于PDA平板上生长2～3 d，镜检新生菌丝，有锁状联合的新生菌丝转接到PDA试管中，编号，保藏。?? 　　1.4?ε嘌?料的配制过程 　　将木屑和麸皮按比例混合，加入水，混匀，装料。试管（口径25 mm，长度150 mm）装料量占整个试管的三分之一，每管装料约50 g，最后用棉花塞封口，121 ℃灭菌90 min。?? 　　1.5?λ?核菌株的出菇实验 　　杂交得到的双核菌株活化后接入PDA平板上，24 ℃培养7 d，用直径为0.8 cm的打孔器沿菌落边缘打孔，将打孔块接种于装有培养料的试管中，每管接2块，24 ℃暗室培养20 d后拔取棉花塞，进行料面搔菌处理，后加入5 mL左右无菌水，8层无菌纱布封口,24 ℃浸泡12 h，倒掉多余的水，放入13～14 ℃培养箱中诱导出菇。每处理3个重复。?? 　　1.6?λ?核菌株子实体颜色标记和菌柄深色部分占整个菌柄比率的计算 　　金针菇双核子实体从原基出现到子实体成熟大约需要7 d，一般在7 d左右、子实体尚未开伞时采摘。为防止不同时间拍摄的子实体照片在色彩上的差异，将采摘的新鲜子实体与PANTONE FORMULA GUIDE(PA??GG??1104)色卡对照，标出子实体所表现的颜色编号；用直尺测量菌柄深颜色部分的长度和菌柄的总长度，计算深色部分占菌柄总长的比率，每个菌株取5个子实体测量，最后求平均值。?? 　　蚁瑞荣，等：金针菇杂合菌株子实体颜色遗传分析 　　 　　2 结果与分析 　　 　　2.1?Σ煌?黄白单核杂交得到的双核菌株出菇后的子实体颜色 　　在供试的5个黄色单核和7个白色单核的杂交中，除2个组合未能得到双核体，其余均获得双核体后代且均在出菇实验中获得杂合子实体，杂合子实体表现出深浅不同的黄色(见封三中图1)。通过对照PANTONE色卡发现，单个子实体的菌盖和菌柄颜色色系相差较小，而不同组合子实体的菌柄基部深色部分的色系存在着多样性，且菌柄深色部分占整个菌柄长度的比率也不相同（见表1），可见杂合菌株中存在一系列的浅黄色过度色，其颜色表达除了受环境因素影响外，主要受到杂合菌株的遗传因子的控制。 　　 　　*子实体颜色编号，根据PANTONE FORMULA GUIDE(solid c