高效筛选优质细胞系-MolecularDevices.PDFVIP

高效筛选优质细胞系 加快重组蛋白和单克隆抗体生产细胞系的开发 内容 细胞系开发流程 2 应用：抗体和重组蛋白 杂交瘤细胞筛选 4 单克隆抗体 8 G-蛋白偶联受体10 细胞克隆筛选技术 其他蛋白质 11 方法学比较 5 快速、强大的克隆筛选方法 6 单克隆性 12 细胞系开发解决方案 13 For more information, visit Cell line development workflow 前言 在过去的十年里，采用哺乳动物细胞生产单克隆抗体和重组 细胞系开发流程 蛋白促进了生物治疗蛋白的繁荣。从1986年第一个重组蛋 杂交瘤细胞、CHO细胞以及HEK 293细胞是常见的宿主细 白药物获批到2011年，总共有96个重组蛋白药物获批上市 胞用于表达重组蛋白药物。开发稳定细胞系的第一步是向宿 1, 3。全球市场从2014年到2019的增长率预计为12.5%， 主细胞转入重组质粒。如果生产的是抗体，传统方法通过将 到2019年预计达到39.6亿美元2。推动这一发展的关键因 骨髓瘤细胞和B细胞融合获得杂交瘤细胞。这些B细胞通常 素包括：日益增长的单抗药物需求、新颖细胞系技术的出现 来自动物，比如小鼠。细胞转染或者细胞融合后，需要筛选 以及疫苗产量的提升2。随着竞争加剧，对降低细胞系开发 大量细胞克隆以获得高表达的细胞(如CHO细胞)或抗原特 成本以及缩短上市时间的需求变得愈发紧迫。本文概述了细 异性的细胞(如杂交瘤细胞)。一旦确定候选细胞克隆，一系 胞系开发的流程，并介绍了高通量筛选方法用于更快、更方 列功能分析将用于确定、验证和表征细胞株。最后，细胞克 便地开发高产细胞系。 隆将逐级放大培养，并开展工艺优化。 A 重组蛋白生产细胞系开发流程 图1：重组蛋白生产细胞系 (A)和杂交瘤细胞系(B)的开 转染