株邻苯二甲酸二丁酯降解菌的分离鉴定及其相关降解基因的克隆.pdf

第 30 卷第 9 期 环 　　境 　　科 　　学 Vol . 30 ,No . 9 2009 年 9 月 ENVIRONMENTAL SCIENCE Sep . ,2009 4 株邻苯二甲酸二丁酯降解菌的分离鉴定及其相关降 解基因的克隆 1 1 1 ,2 1 1 1 1 吴学玲 ,金德才 ,赵维良 ,梁任星 ,李乾 ,杨宇 ,邱冠周 ( 1. 中南大学资源加工与生物工程学院 ,长沙 　410083 ; 2 东吴大学微生物学系 ,台北 ,中国台湾) ( ) 摘要 :从土壤中分离纯化出4 株能降解邻苯二甲酸二丁酯 DBP 的菌株 ,分别命名为JDC1 、JDC8 、JDC9 、JDC12 ,并对其进行 ( ) 了形态学 、生理生化及分子生物学鉴定. 菌株革兰氏染色阳性 , 16S rDNA序列分析显示 4 株菌均与节杆菌属 A rthrobacter sp . 有 99 %以上的序列相似性 ,初步判断这 4 株菌为 A rthrobacter sp . . 通过 PCR 扩增及克隆 ,均获得了 1 个约 900 bp 的DNA 片段 ,测序 结果显示该片段与 A rthrobacter keyseri 的邻苯二甲酸 3 ,4双加氧酶基因的核苷酸序列相似性为 96 %以上. 对 4 株菌的最适生长 条件及对 DBP 的降解能力进行了分析 ,结果显示 ,4 株菌的最适生长条件为p H 70～85 ,温度 30～35 ℃. 以DBP 作为 目标测试 物 ,在适宜条件下测试了4 株菌的降解能力 ,显示这 4 株菌均为高效降解菌 ,效率最高的JDC1 能在 28 h 内将 500 mgL 的DBP 降解完全 ,最慢的JDC8 经 40 h 能将 500 mgL 的DBP 降解完全 ,本研究对于 DBP 降解机制的研究及微生物资源的开发都具有 重要意义. 关键词 :邻苯二甲酸二丁酯 ;节杆菌属 ;分离 ;鉴定 ;生物降解 ;邻苯二甲酸双加氧酶 ( ) 中图分类号 :X172 　文献标识码 :A 　文章编号 2009 Isolation and Identif ication of Four D BPDegrading Strains and Molecular Cloning of the Degradation Genes 1 1 1 ,2 1 1 1 1 WU Xueling , J IN Decai , CHAO Weiliang , L IAN G Renxing , L I Qian , YAN G Yu , QIU Guanzhou ( 1. School of Resources Processing and Bioen