实验3环境影响因子.doc

實驗3:環境影響因子 目的:瞭解有哪些環境因子會影響微生物之生長,在此實驗,主要探討溫度及紫外光之作用 溫度原理: 微生物生長的溫度在-5度C到80度C,其範圍極廣,然而不同的微生物,適合其生長的溫度有明顯的差別,每種微生物只能生長於一個較窄的溫度範圍,其主要原因試溫度為影響微生物內酵素活性的主要因子,為生物缺乏調節代謝作用產生熱的能力,因此其酵素活性易受熱生成的高溫所抑制. 環境中不適合的低溫環境會降低酵素的活性,微生物的新陳代謝會加速反應,但卻伴隨著為生物體內酵素和蛋白質的嚴重傷害(變性),導致微生物死亡. 紫外光原理: 除了藻類與光合作用細菌可利用日光做為生長時的能源外,微生物生長時對日光的需求並不顯著,有時甚至是一種傷害.地球所接受的日光為一由長波(800nm)至短波(200nm)所組成連續光譜,其中亦包括了紫外光,紫外光對大多數的微生物會造成傷害作用,特別是2400~3000波長者,其中,2650是微生物DNA最易吸收的波長,此波長的紫外光被吸收後,明顯改變了微生物怡傳訊息的傳遞和突變速率,並產生雙嘧啶聚合物,此一產物能吸收紫外光和相鄰能階的能量,干擾DNA分子的正常功能和複製作用,並進而導致微生物的死亡.但是經過紫外線殺菌處理的微生物,若在於3650~4500的波長照射處理,這些微生物將可重獲生機,這種復活線向,特別稱為”光復活作用” 步驟 1.先向隔壁一組借大腸菌液做為這次實驗的菌液 2.像做培養皿的組別拿取12個培養皿(六個做溫度 六個做紫外光) 3.必須稀釋至10的-5次方(老師抱歉,課本上有寫要稀釋,可是實驗的那張紙沒有寫到稀釋我們有做稀釋的只有紫外光的那些培養皿,所以不同溫度的實驗失敗了sorry!!) 5.取0.1ml滴在培養皿中央,給三腳彎棒滅菌並做塗碟法, (a)溫度實驗:以上兩個為一組,分別放在冰箱,37度C.60度C培養箱內隔天看結果 (b)紫外光實驗:將塗碟過之培養皿至於無塵無菌操作台內,將蓋子打開,開啟紫外光燈照射,在不同時間時回收培養皿(我們是五分鐘),收回之培養皿至於37度C培養箱培養,隔天看結果 實驗結果 溫度實驗: 老師對不起因為沒稀釋,隔天看到培養基上得菌多得難以分辨,所以實驗失敗了!! 紫外光實驗: 使用菌液:大腸菌 稀釋倍數:10的-5次方 5min: 菌落數:85 生菌數=85x10000/0.1fu/ml 10min 菌落數:大約73 生菌數=73x10000/0.1fu/ml 15min 菌落數:71 生菌數=71x10000/0.1fu/ml 20min 菌落數: 57 生菌數=57x10000/0.1fu/ml 25min 菌落數:大約200 生菌數=200x10000/0.1=200000000cfu/ml 30min 菌落數: 43 生菌數=43x10000/0.1fu/ml 作圖: 問題與討論 由實驗結果說明何種溫度(4度C.37度C.60度C)較適合大腸桿菌與活性汙泥的生長? Ans:實驗失敗!! 資料查詢得知大腸菌最適合的溫度是37度C可生存溫度是10~45度C 說明溫度對微生物生長的影響,微生物一不同溫度可分為幾類? Ans:溫度會影響微生物內酵素活性.不同溫度可分嗜高溫菌.嗜中溫菌.嗜冷菌?? 何謂最適生長溫度?此溫度是否對所有微生物的活動均有利? Ans:是指微生物於此溫度其生長將可達到最快,不同微生物有不同的最適生長溫度 討論利用溫度控制微生物生長的可行性並舉日常生活中實際應用之實例 Ans:冰箱可以抑制微生物的生長 由實驗結果討論紫外燈照射時間的長短對微生物生長之影響? Ans:除了25分鐘不看的話,照射紫外光越長的時間為生物數量明顯遞減 紫外光對微生物生長有甚麼影響? Ans:紫外光具有殺死微生物細胞的功用,他會干擾DNA分子的正常功能和複製作用,進而導致微生物的死亡. 操作無菌操作檯與無菌操作檯之紫外燈時應注意的事項為何?人體暴露於紫外燈下有甚麼害處? Ans:必須培養皿放進去之後關起來才能打開紫外光的開關,要取出來時必須關掉紫外光的開關.對人體的皮膚以及眼睛都有害,眼睛會受損,嚴重的話會皮膚癌 討論利用紫外光控制微生物傷長的可行性並舉日常生活中實際應用之實例 Ans:醫院手術室或實驗室中對空氣.疫苗.血清與毒素中的微生物滅菌 心得報告 四環2A 4970E114 唐緯績 這次做的實驗室環境下的因素對微生物的影響,取了溫度和紫外光兩個因素,我們這一組一開始就做錯了,因為菌液沒有稀釋,所以實驗結果出來的菌落密密麻麻XD 真的試失敗中的失敗,為什麼每次都做不好?唉,沒辦法,只好下次會更好! 整體來說過程都很簡單,因為是稀釋(做過了