寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究.docVIP

本科生毕业论文 药学院生物制药专业i年级 学 号 学生姓名 实习单位 南京大学华子春教授研究室 论文题目寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究 指导教师 起止时间 20木木.01.04一20木木.06.03 20**年6 月2 日 学位论文 性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行 研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用或参考的内容外，本论文不含 任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重 要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标注。 本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文 签名： 日期： 年_月 日 学位论文 协议书 本人完全了解关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：本校学生在 学习期间所完成的学位论文的知识产权归所拥有。有权保留并向国家有关部 门或机构送交学位论文的纸本复印件和电子文档拷贝，允许论文被查阅和借 阅。可以公布学位论文的全部或部分内容，可以将本学位论文的全部或部分 内容提交至各类数据库进行发布和检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制 手段保存和汇编本学位论文。 论文 签名： 导师签名： 曰期： 年 月 日 日期： 年 月 日 寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究 目的：探索寡聚精氛酸修饰人内皮抑素融合蛋白的表达与纯化条件。方 法：将人内皮抑素基因克隆至pBV220载体同时在N端加寡聚精氛酸修饰形成新 融合蛋白，于培养基中培养。在摇床中经温度诱导培养后，取样进行SDS —PAGE 分析，判断是否表达成功。用Ni柱亲和纯化该表达蛋白，样品洗脱液进行SDS — PAGE分析，判断是否纯化成功。结果与结论：经过SDS — PAGE分析，寡聚精 氨酸修饰人内皮抑素的融合蛋白能够很好的表达与纯化，为下一步进行的活性研 究奠定基础。 关键词人内皮抑素；寡聚精氛酸；融合蛋白；表达；纯化 To study the expression and purification conditions ofOligoarginine modifying human endostatin Ju Hongxiao Abstract Objective: To explore the expression and purification conditions of Oligoarginine modifying human endostatin fusion protein. Methods : The Human endostatin gene which was cloned into pBV220 carrier and adding arginine oligomer to N terminal to form new fiision protein was cultivated in the culture medium. After temperature induction culturing in the Shaking table, analyzing samples by SDSto determine whether expressing succcssfully.Thcn the way of affinity purification of expression protein is using Ni affinity column. In the same way,analyze these samples whether purifying successfully. Results and conclusion: According to the SDSanalysis，proved that arginine oligomer modified human endostatin fusion protein can be expressed and purified well.This study laid the foundation for the next steps of the activity study. Key words： Human endostatin,； Arginine oligomer，； Fusion protein，； Expression； Purification 在生活条件越来越好的现在，肿瘤成为一个困扰人们的重大问题，威胁着人 类生命健康，于是其诊断和治疗方法成为医学和生命科学的研宄热点。R前，对 于肿瘤的治疗，主要以手术、化学药物治疗和放射性治疗为主，但从肿瘤生长 方而考虑，还可以抑制肿瘤血管来遏制肿瘤达到治疗FI的。内皮抑素就是一种抑 制肿瘤血管生成的抗血管生成因子之一，所