肥厚型心肌病现代诊治疗展望教学课件.pptVIP

我们克隆的肥厚型心肌病致病新的致病基因 遗传病因 1）筛查8-10个基因的突变，50%的HCM可以找到基因突变， 严格、认真筛查，找到基因突变的比率达到70% 2）目前报告突变位点1000个左右；外显率（50%-95%）与年 龄相关 3）2-5%的患者存在复合突变。两个拷贝均有同样突变-纯合子，含有两个不同的突变位点- 杂合子，这种患者发病早，病情严重 4）年死亡率1% 五，功能判断：肥厚型心肌病发病机制 1.“毒肽学说”，突变基因指导合成“毒肽”，干扰正常肌 小节蛋白功能； 2. 单倍体功能不足（Haploinsufficient）学说，单个功能 正常基因不足一产生足量功能正常的肌小节蛋白量； 3. 心肌能量障碍（磁共振磷谱，峰氧耗量小于预计氧耗的 75%） 利用磁共振现象和化学位移作用，系列分析特定原子核及 其化合物的定量方法。 磷谱主要反映人体组织细胞的能量代谢改变，磷化物的浓 度与能量代谢密切相关，测定磷代谢产物的相对浓度和分 布可确定细胞的能量状态。 心肌的主要功能就是将其蕴藏的化学能连续不断地转变为 心脏舒缩的机械能。 利用31-P MRSI检测心脏代谢。 哌克昔林（perhexiline，冠心宁，心舒宁）100 mg bid 症状性肥厚型心肌病：校正能量缺乏、改善运动量 （Circulation 2010，122: 1562-1569） 心肌血流灌注障碍：是左心室重塑与心血管死亡的独立预测指标。应激性冠脉血流灌注低（冠脉储备功能的评估方法：SPECT，PET，心核磁），潘生丁负荷引起冠脉血流障碍的HCM患者，死亡率高。 潜在的新治疗方法 基因沉默(gene silencing) 在不损伤本身DNA的情况下，使基因不表达或低表达。 选择性沉默突变等位基因，而不影响野生型等位基因表达，阻止突变基因表达或校正突变基因，可能是一种理想的治疗选择。 基因沉默发生在两个水平： （1）转录水平的基因沉默：表观修饰，DNA甲基化、异染色质化以及位置效应等。 （2）转录后基因沉默，即在基因转录后的水平上通过对靶标RNA进行特异性抑制而使基因失活，包括： 反义RNA、共抑制(co-suppression)、基因压抑(quelling)、RNA干扰(RNAi)和微小RNA (miRNA)介导的翻译抑制等。 微小RNA技术 小发卡或短发卡RNA（a small hairpin RNA or short hairpin RNA, shRNA）：是一段具有紧密发卡环的RNA序列，常被用于RNA干扰，沉默靶基因的表达。 siRNA：小或短的干扰RNA（small/short interfering RNA, siRNA）是一类20-25个核苷酸长度的双链RNA分子，其主要在RNAi通路中起作用，干扰特异基因的表达。 微小-RNA技术的问世，使我们看到了实现这一理想的曙光，从理论上，利用人工合成的siRNA （小或短干扰RNA）/shRNA（小发卡或短发卡RNA），可以阻遏基因表达。 微小RNA技术的2个障碍 1.目前还不能够保证沉默突变等位基因的同时，不影响 野生型等位基因。 2.如何把人工合成的siRNA准确的释放到心脏；维持体内 siRNA持续、长期释放、长期沉默突变等位基因的问题 也没有解决。 RNA催化技术 鉴于RNA既可作为信息载体，又具有催化功能，换句话说就是既有DNA样作用，又可以发挥蛋白质功能。 催化RNA技术：以突变mRNA为靶，选择性的瞄准突变等位基因，使突变基因功能缺失。 RNA催化技术-锌指结构 锌指结构是由4个氨基酸残基与1个锌离子结合形成稳定的空间结构，由于形成的结构状似手指，故称锌指结构。 锌指结构再通过蛋白质 中的α螺旋与DNA双螺旋 结构上较深的螺旋形凹 沟结合，从而识别特定 的DNA序列 通过锌指DNA结合 结构域(zinc-finger DNA-binding domain)将核酸酶 靶定至目的基因 处，从而构建出敲 除目的基因的哺乳 动物细胞系。 以突变mRNA为靶 或以锌-指核酸酶为 靶，在DNA水平， 选择性的瞄准突变 等位基因。 已有动物或细胞试 验证明，锌-指核酸 酶能够使基因缺 失，甚至校正点突 变。 锌指技术的安全隐患 虽然锌指技术对解决许多困扰基因疗法领域的问题具有潜在优势，但，锌指结构对靶