缝隙连接蛋白43与大鼠脊髓损伤的相关性研究-外科学(骨科)专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 福建医科大学 2014 届硕士研究生毕业论文 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 英汉缩略词表1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要2 HYPERLINK \l _bookmark2 英文摘要3 HYPERLINK \l _bookmark3 前 言5 HYPERLINK \l _bookmark4 材料与方法7 HYPERLINK \l _bookmark5 实验方法及步骤10 HYPERLINK \l _bookmark6 结 果19 讨 论26 结 论31 参考文献 错误!未定义书签。 综 述37 HYPERLINK \l _bookmark7 附表Ⅰ BBB 评分项目表 46 HYPERLINK \l _bookmark8 致 谢48 英汉缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 SCI Spinal cord injury 脊髓损伤 Cx Connexin 缝隙连接蛋白 Cx43 Connexin43 缝隙连接蛋白 43 As Astrocyte 星状胶质细胞 GJ Gap junction 缝隙连接 ODNS Antisense oligodeoxynucleotides 反义寡核苷酸 GFAP glial fibrillary acidic protein 胶质纤维酸性蛋白 Ch Connexin hemichannel 连接蛋白半通道 ATP Adenosine triphosphate 三磷酸腺苷 mRNA Messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 PBS Phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲液 CNS Central nervous system 中枢神经系统 BBB Basso-beattie-bresnahan BBB 运动功能评分 WB western-blotting 蛋白质印迹 HE Hematine-eosin 苏木精-伊红 RT-PCR Reverse transcriotion-polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链反应 Ca2+ calciumion 钙离子 K+ kalium 钾离子 1 缝隙连接蛋白 43 与大鼠脊髓损伤的相关性研究 中文摘要 目的 本实验通过建立大鼠脊髓损伤的动物模型，通过行为学观察及 Cx43、 GFAP mRNA 和蛋白的表达变化，初步探讨缝隙连接蛋白 43 对脊髓损伤关系，进 一步了解脊髓损伤的病理过程及为临床治疗提供实验室依据。 方法 选择 36 只雌性成年 SD 大鼠随机分成两组：假手术组（n=6）、脊髓 损伤模型组（n=30,根据不同时相点随机分成 5 个小组，每组 6 只）。假手术组 只打开椎板暴露脊髓，不损伤脊髓；脊髓损伤模型组，用改良 Allen 法建立大鼠 T10 脊髓损伤模型，在每一组动物伤后 6 h、12 h、1d 、3 d、7 d5 个时相点分 别进行脊髓功能 BBB 评分，取损伤处脊髓组织用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR） 和 western-blot 法检测缝隙连接蛋白 43（Connexin43, Cx43）、胶质纤维酸性 蛋白（glial fibrillary acidic protein ,GFAP）的表达变化，并进行单因素 方差分析。 结果 （1）BBB 评分结果：BBB 评分结果：假手术组（只打开椎板暴露脊髓， 不损伤脊髓），脊髓神经功能正常，双人双盲法 BBB 评分高达 20 分；脊髓损伤 模型组，BBB 评分随时间增加而逐渐增大，脊髓损伤组各时相点与假手术组比较 P＜0.01。 (2) 逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）结果：CX-43mRNA 在脊髓损伤第 1 天就有上升，第 3 天达高峰，然后逐渐下降，但仍比正常要高，GFAP 脊髓损伤 后逐渐增高，随着脊髓损伤后时间点逐渐增高，术后第 7 天仍然逐渐升高, 假手 术组与各时相点有统计学意义（P＜0.05）。 （3）western-blot 法结果：缝隙连接蛋白 43 在脊髓损伤第 1 天就有上 升，第 3 天达高峰，然后逐渐下降，但仍比正常要高，GFAP 脊髓损伤后逐渐增 高，随着脊髓损伤后时间点逐渐增高，脊髓损伤后第 7 天仍然逐渐升高，假手术 组与各时相点有统计学意义（P＜0.05）。 结论 通过观察缝隙连接蛋白 43 及 GFAP 的变化，初步探讨缝隙连接蛋白 43 可能参与脊髓损伤病理过程。 关键词 脊髓损伤，星形胶质细胞，胶质纤维酸性蛋白，缝隙连接，缝隙连 接蛋白 43。 2 英文摘要 Study on the correlation between connexin 43 and spinal