肝脏X受体激动剂保护NMDA诱导小鼠内层视网膜损伤的实验研究-眼科学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 NMDA 英文全称 N-methyl-D-aspartate 中文名称 N-甲基-D 天冬氨酸 LXR Aβ APP Liver X receptor Amyloid β Amyloid precursor protein 肝脏 X 受体 β 样淀粉蛋白 淀粉样前体蛋白 RGC Retinal ganglion cell 视网膜神经节细胞 AD Alzheimer’s disease 阿尔茨海默病 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 GCL Ganglion cell layer 神经节细胞层 INL Inner nuclear layer 内核层 HE ERG Hematoxylin and Eosin Electroretinogram 苏木精-伊红染色 视网膜电图 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 ABCA1 ATP-binding cassette transporter A1 腺苷三磷酸结合盒转运体 A1 TUNEL Transferase-mediated deoxyuridine 转移酶介导的三磷酸脱氧 NeuN triphosphate-biotin nick end labeling Neuronal nuclei 鸟苷-生物素刻痕末端标记 神经元核抗原 TNF-α NF-κB Tumor necrosis factor Nuclear factor kappa B 肿瘤坏死因子-α 核转录因子 kappa B BACE1 GAPDH β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme Glyceraldehyde-phosphate β-位淀粉样蛋白前体蛋白 裂解酶 1 甘油醛磷酸脱氢酶 dehydrogenase EAU Experimental autoimmune uveitis 自身免疫性葡萄膜炎 AMD Age related macular degeneration 年龄相关性黄斑变性 1 肝脏 X 受体激动剂保护 NMDA 诱导小鼠内层视网膜损伤 的实验研究 摘要 目的：探讨激动肝脏 X 受体（LXRs）对 N-甲基-D 天冬氨酸（NMDA） 诱导小鼠内层视网膜损伤的保护作用及其机制。 方法：将 C57/BJ 小鼠随机分为 NMDA 诱导视网膜损伤组， NMDA+TO90 治疗组和对照组。从玻璃体腔注射 NMDA 前 3 天到注射 后 24 小时或 7 天给予 LXRs 激动剂 TO901317（TO90，50mg/kg）或溶 媒灌胃。利用 HE 和 TUNEL 染色观察视网膜形态结构变化及计数视网 膜神经节细胞层（GCL）凋亡神经元数目，通过免疫荧光检测视网膜 神经节细胞（RGCs）数量的变化。视网膜电图（ERG）评估视网膜功 能。RT-PCR 及 ELISA 检测小鼠视网膜 caspase-3，bax，bcl-2，TNF-α， 和 β 样淀粉蛋白（Aβ）形成限速酶 BACE1 的表达。RT-PCR 和 Western blotting 检测视网膜 NF-κB 亚基 p65，LXRs 及其靶基因 ABCA1 的表 达。采用免疫组化和 Western blotting 的方法对小鼠视网膜中的 Aβ 进行 定位和定量检测。 结果：损伤组和治疗组的 LXRβ 表达水平高于对照组，而 LXRα 无明显变化。相较损伤组和对照组，TO90 治疗组靶基因 ABCA1 的水 2 平明显升高。提示 LXRβ 的激活是以一种配体依赖的方式进行。LXRβ 的激活可明显抑制 NMDA 所致的 RGCs 的减少，改善 NMDA 导致的 视网膜功能损害。同时下调凋亡因子 caspase-3、bax，上调抗凋亡因子 bcl-2 的水平。给予 TO90 治疗后，TNF-α、NF-κB，BACE1 及 Aβ 水平 较损伤组明显降低。 结论：激活 LXRβ 在 NMDA 所诱导的内层视网膜损伤中具有保护 作用。而这一神经保护作用可能是通过抑制视网膜内 Aβ 的形成和下调 NF-κB 信号通路机制来实现的。提示 LXR 激动剂有望成为一种新的治 疗视网膜损伤的药物。 关键词：视网膜，肝脏 X 受体，NMDA，神经节细胞凋亡，β 样 淀粉蛋白 3 ACTIVATION OF LIVER X RECEPTOR PROTECTS INNER RETINAL DAMAGE INDUCED BY N-METHYL-D-ASPARTATE IN MICE ABSTRACT Purpose: To investigate