[练习]生物分离工程思考题.docVIP

《分离》PPT思考题及部分答案 分离概述 1 生物产品与普通化工产品分离过程有何不同？ 生物下游加工过程特点： 1：发酵液组成复杂，固液分离困难——这是生物分离过程中的薄弱环节 2：原料中目标产物含量低，有时甚至是极微量——从酒精的1/10到抗菌素1/100， 酶1/100万左右，成本高。 3：原料液中常伴有降解目标产物的杂质——各种蛋白酶降解基因工程蛋白产物， 应快速分离。 4：原料液中常伴有与目标产物性质非常相近的杂质——高效纯化技术进行分离。 5：生物产品稳定性差 ——严格限制操作条件，保证产物活性。 6：分离过程常需要多步骤操作，收率低，分离成本高——提高每一步的产物收得 率，尽可能减少操作步骤。 7：各批次反应液性质有所差异——分离技术具有一定的弹性。 2 设计生物产品的分离工艺应考虑哪些因素？ 产品的性质（2）成本（3）工艺步骤（4）操作程序（5）生产方式（6）生产规模 （7）产品稳定性（8）环保和安全 3 初步纯化与高度纯化分离效果有何不同？ 初步纯化是将目标物和与其性质有较大差异的杂质分开，使产物的浓度有较大幅度的提高，可采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作. 高度纯化主要是除去与目标物性质相近的杂质，是产品的精制过程，可采用层析（柱层析和薄层层析）、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱. 4 如何除去蛋白质溶液中的热原质？ （1）生产过程无菌（2） 所有层析介质无菌（3） 所用溶液无菌（4）亲和层析（多粘菌素） 5 生物分离为何主张采用集成化技术？ 6 纯化生物产品的得率是如何计算的？若每一步纯化产物得率为90%，共6步纯化得到符合要求产品，其总收率是多少？ 得率=产品中目标产物总量/原料中目标产物总量 总收率=（90%）6 =53.1441% 发酵液预处理 1 发酵液为何需要预处理？处理方法有哪些？ 发酵产物浓度较低，大多为1%—10%，悬浮液中大部分是水；2、悬浮物颗粒小，相对密度与液相相差不大；3、固体粒子可压缩性大（细胞在很大程度上属于可压缩的粘稠物料）；4、液相粘度大，大多为非牛顿型流体；5、性质不稳定，随时间变化，如易受空气氧化、微生物污染、蛋白质酶水解等作用的影响。 处理方法： 凝集和絮凝 加热法 调pH法 加水稀释 加助滤剂法 加吸附剂或加盐法 热处理法 离子交换和活性炭吸附法 2 如何使用助滤剂? 助滤剂的使用方法有两种： ①在过滤前先在过滤介质表面预涂（铺）一层助滤剂。 ②助滤剂按一定比例均匀加入待过滤的料液中。 3 凝集与絮凝过程有何区别？如何将两者结合使用？ 答：凝聚：指在投加的化学物质（铝、铁的盐类或石灰等）作用下，胶体脱稳并使粒子相互聚集成１ mm 大小块状凝聚体的过程。机理：a 中和粒子表面电荷 b 消除双电层结构 絮凝：指使用高分子絮凝剂（天然的和合成的大分子量聚电解质）能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团（10mm）的过程。其中絮凝剂主要起架桥作用。机理：架桥作用 结合使用：在发酵液中加入具有高价阳离子的电解质，由于能降低ζ电位和脱除胶粒表面的水化膜，就能导致胶粒间的凝聚作用4 错流微滤与传统过滤相比有何优点？ （1）传统过滤作用是由两个过程组成：筛选作用和吸附作用。如果微粒比滤层的孔隙大，即产生筛选作用。混浊微粒被截留，不仅是筛选作用的结果，也是过滤层里面发生的吸附作用的结果。在悬浮微粒过滤时，微粒的直径使它不可能通过缝隙的入口时，被截留在过滤层的表面上，微粒又形成了第二道过滤层，在入口孔隙的上方积累，随之堵塞了他们。 （2）错流过滤打破了传统过滤的机制，即液体的流向和滤膜相切，使得滤膜的孔隙不容易堵塞。被过滤的发酵液在压力推动下，带着混浊的微粒，以高速在管状滤膜的内壁流动，而附着在滤膜上的残留物质很薄，其过滤阻力增加不大，因而能在长时间内保持稳定不变的过滤速度。优点: 1.克服介质阻力大 2.不能得到干滤饼 3.需要大的膜面积 4.收率高 5.质量好 6.减少处理步骤 7.染菌罐也能进行处理 细胞破碎 细胞破碎的常用的方法有哪些？ 珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法、酶溶法、化学渗透法 机械法、超声波法等在破碎细胞时应该共同注意什么？ 3.酶消化法和碱处理法都是细胞破碎的有效方法，但是也都有各自的什么缺点？ 酶消化法缺点： 价格高，通用性差，产物抑制的存在 碱处理法缺点： 操作时间长 易引起活性物质失活 对产物存在着一定的毒性且会给产物的纯化带来困难，影响产物浓度 工业生产中对于细胞破碎常用的生产工艺流程有那些？ 沉析、沉淀 1.理解概念：硫酸铵饱和度，盐溶， 盐析 2