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微生物之生长曲线目的检验酵母菌在一定份量的养分中生长数量
微生物之生長曲線
實驗目的:
檢驗酵母菌在一定份量的養分中生長數量的變化
實驗原理:
酵母菌在一定養分中,因為得到能量而進行繁殖,但又因為繁殖的養分隨著時間遞減,使的酵母菌因為失去養分而死亡。
實驗步驟:
酵母菌液之配置,取0.5酵母菌粉加入50ml培養液中及1g葡萄糖搖晃均勻,此菌液接下來有兩步驟
取部分菌液加入比色管(約八分滿),以分光度計測其吸光值(濁度),波長為595nm
以塗碟法,測菌數,取0.1ml菌液滴於培養基正中央,以滅菌之三角灣棒均勻塗抹(菌液要先經過適當稀釋後才塗碟,否則菌數太多,事後再推算原菌液數,建議稀釋至10-
將菌液瓶至於37℃培養箱震盪培養,15mins取出瓶子,取部分菌液,重複第一項之(a)及(b)
分光光度計使用時,要先以培養液加入2比色管中,分至於儀器凹槽,最為基準線之校正,而後僅置換靠外凹槽之比色管,重新加入第一項之菌液,此值為0時之吸光值,而後每隔一段時間依法置換比色管,測得各時間之吸光值
實驗數據:
左:0分鐘 右:15分鐘 左:30分鐘 右:45分鐘
左:60分鐘 右:75分鐘
時間點
0
15
30
45
60
75
菌數
150
190
280
250
150
130
吸光質
0.005
0.007
0.013
0.011
0.005
0.004
數據討論:
微生物生長曲線
遲滯期:0分鐘時
因為15分鐘觀察一次,數據間隔較寬,遲滯期推測應該在時間點0分鐘到15分鐘這段期間
對數期:時間點0分鐘至時間點30分鐘時
因為對數期應為遲滯期至穩定期中間,微生物獲得養分,開始繁殖。
穩定期:時間點30分鐘
因為15分鐘觀察一次,數據間隔較寬,穩定期推測應該在時間點30分鐘附近。
死滅期:時間點30分鐘
因為死滅期為穩定期之後,微生物因養分不足而死亡。
問題與討論:
說明各組實驗結果(包含數據與圖形)之生長曲線進行至那一期?此圖形有何意義?
進行至死滅期,圖形說明了酵母菌到30分鐘時進入了死滅期,因為無法獲得能量(葡萄糖)而死亡。
說明各組生長曲線的適應期有多長?為什麼此一時期的吸光值都沒有顯著增加?若此時期所得的吸光度值成不規則上下跳動,應如何解釋?
遲滯期:時間點0分鐘,因為15分鐘測一次,所以無明顯的數據
對數期:約時間點30分鐘,因為此時間點菌數明顯的增加
穩定期: 時間點0分鐘,因為15分鐘測一次,所以無明顯的數據
死滅期:從時間點30分鐘過後菌數開始下降,進入死滅期
測訂微生物的生長曲線在微生物學上有何意義?
細菌要進行繁殖,靠的是在一定的養分中獲取能量,但繁殖的養分會隨著時間來遞減,使的細菌因為失去養分而死亡,因此可得它的繁殖時間、溫度所需能量
說明分光光度計的測定原理與實驗步驟?
原理:濃度高的液體,菌液中所包含的菌數量多,使的光線難以穿透,所以吸光值高,相反的,濃度低的液體,菌數量少,光線容易穿透,吸光值低
實驗步驟: 先拿培養液裝進比色管中,對分光光度計調整實驗需要的波長,按下校正歸0,取出比色管,之後可以把要量的菌液放入比色管中量取吸光值。
心得:
黃翰揚: 生長曲線在環境為生物裡面算是TOP有印象排行榜的頭頭,從微生物生長曲線連想至生活周遭可能的事情,一開始爬的在快最後也會趨近恆定最後衰弱,看來是想告訴我們要謙沖像飽實的稻穗吧!!
吳啟瑋: 本次實驗內容是生長曲線,雖然實驗並不困難但是需要注意的要素有很多,例如時間的掌握或是稀釋的時候是否有被污染,這次實驗做出來的生長曲線並沒有想像中的那麼漂亮,也許是忽略一些要素 導致實驗沒有那麼的成功。
郭倩彣:這次的實驗老實來說就是一直不斷重複一樣的動作,但是細菌數卻隨著時間的變化不斷地在改變,看著他們極速生長到下降,想到如老師所說的,人生有很多例子也都跟細菌的這個生長曲線很像,令我有無限的感慨。
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