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双酶法合成D-(-)-对羟基苯甘氨酸.PDF
Journal of China Pharmaceutical University 2001, 32(2):155 ~ 158 155
D-(-)-
*
马 飞 许激扬 何林松 李 隽
(, 210009)
研究用土壤杆菌CPU1295 完整细胞双酶转化法生产D-(-)-对羟基苯甘氨酸。 通过
测定D-海因酶 D-氨甲酰酶的比活力来选择发酵和转化反应条件。 经优化, 两酶化活力分别达到 1.3
u/ml 发酵液和0.46 u/ml 发酵液, 终产物经鉴定为D-(-)-对羟基苯甘氨酸。 本法是一种有发展前途的生
产工艺。
D-对羟基苯甘氨酸;对羟基苯乙内酰脲;土壤杆菌;D-海因酶;D-氨甲酰酶
:TQ 464. :A :1000-5048(2001)02-0155-21
D-(-)-(D-pHPG)β- mg, 0.2 g, 0.4 g, 100 ml, pH
、、、 6.5。
, C.0.3 g, 1.0 g, NaCl 0.5 g,
。 100 ml, pH .3。
D- (DHase)D-(DCase) D.0.3 g, 1.0 g,KH2PO4 1.36 g,
、、、 MgSO ·H O 20 mg, 100 ml, pH .0。
4 2
[1] [2]
, ,
, 19 9 Olivieri
Agrobacterium radiobacter
[3]
, 1981
[4]
D- , 、、、、、、
、。
Agrobacterium sp.CPU1295
D-pHPG , 1。
1
1.1 菌种
Agrobacterium sp.CPU1295 (
)。
1.2 培养基
A.0.5 g, 0.5 g, 1 g,Na-
Cl 0.5 g, 2 g, 0.5 g, 100 ml, pH Fig 1.Dualenzymatic synthetic scheme of D-(-)-p-hydroxyphenyl-
.0。 glycine
B.2.5 g, 0.5 g, KH PO 0. g, 1.3 仪器
2 4
Na HPO 0. g, MgCl ·4H O 0.1 g, MnSO ·H O 1 SCS-24 (), 80-2
2 4 2 2 4 2
*
2000-09-14 :Tel:(025)32 1248
156 32
(), HH ·S 11.2 NH4+NCD-pHPG
(), 25 μl , DHase
(), 21 NCD-pHPG 。,
()。 1 μmol NCD-pHPG , 1
1.4 试剂 (u),
、D-pHPG N--D-(-)- , (u/ml)。
(NCD-pHPG), 2.6 DCase 活力的测定[5]
。
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