T4DNA连接酶-西北师范大学.PPTVIP

第三章 基因克隆的酶学基础 第一节 限制性内切酶 3.1.4 限制性内切酶的命名方式 3.1.5 同尾酶和同裂酶 3.1.6 Ⅱ型酶的特点和识别位点 3.1.7 类型II限制性内切酶的主要用途  3.1.8 影响核醚内切限制酶活性的因素 3.2.1 连接酶 3.2.2 常见的DNA连接酶 3.2.3 连接酶的连接作用 3.2.4 DNA的连接策略 第三节 DNA聚合酶 3.3.5 Taq DNA聚合酶 (一)酶活性与热稳定性 (二)离子依赖性 (三)忠实性 (四)抑制剂 ３.３.６　T7 DNA聚合酶 T7 DNA聚合酶有如下几个方面的用途： 修饰的 T7 DNA聚合酶 ３.３.７　末端转移酶 返回第三章 DNA聚合酶：需要模板，有多种活性，催化1个个核苷酸在链的3’接上去Taq DNA聚合酶 ： 来自于嗜热的古细菌逆转录酶：以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成一段与mRNA互补的 DNA片段末端核苷酸转移酶：需要模板 三种活性，即5’-3’的聚合酶活性、5’-3’的核酸外切酶活性和3’-5’的核酸外切酶活性。3’-5’的外切活性比T4或T7聚合酶的相应活性低得多。 3.3.1 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(PolⅠ) 返回第三章 √ × √ √ √ √ 返回第三章 返回第三章 枯草杆菌蛋白酶水解大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ全酶所得 K1enow聚合酶仍具有5’