柱前衍生化HPLC法测定发酵液中L瓜氨酸和L鸟-南京工业大学学报.PDF

第３１卷第２期 南　京　工　业　大　学　学　报　（自然 科 学 版） Ｖｏｌ．３１Ｎｏ．２ ２００９年３月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＮＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｒ．２００９ 柱前衍生化ＨＰＬＣ法测定发酵液中Ｌ 瓜氨酸和 Ｌ 鸟氨酸含量 周　慧，郝　宁，严　明，许　琳 （南京工业大学制药与生命科学学院，材料化学工程国家重点实验室，江苏 南京 ２１０００９） 摘　要：建立一种应用异硫氰酸苯酯将Ｌ瓜氨酸和Ｌ鸟氨酸柱前衍生后进行定量分析的高效液相色谱法．实验 ２ 结果表明，瓜氨酸在０２～２０ｍｇ／ｍＬ范围内线性回归显著（Ｒ ＝０９９９８），平均回收率９９８７％；鸟氨酸在０２～ ２ ２０ｍｇ／ｍＬ范围内线性回归显著（Ｒ ＝０９９９７），平均回收率１００９２％．应用该方法对发酵液中Ｌ瓜氨酸和Ｌ鸟氨 酸含量进行测定取得了满意的结果，能有效指导谷氨酸棒杆菌Ｌ瓜氨酸的发酵生产． 关键词：高效液相色谱；柱前衍生；Ｌ瓜氨酸；Ｌ鸟氨酸 中图分类号：Ｏ６１１６２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１６７１－７６２７（２００９）０２－００７７－０４ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅａｎｄＬｏｒｎｉｔｈｉｎｅｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ ＺＨＯＵＨｕｉ，ＨＡＯＮｉｎｇ，ＹＡＮＭｉｎｇ，ＸＵＬｉｎ （ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓＯｒｉｅｎｔｅｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄ ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＮａｎｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｗｉｔｈｐｈｅｎｙｌｉｓｏ ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｏｎｗａｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅａｎｄＬｏｒｎｉｔｈｉｎｅ．Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｓｏｆＬｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅａｎｄＬｏｒｎｉｔｈｉｎｅｗｅｒｅｌｉｎｅａｒｏｖｅｒｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ０２～２０ｍｇ／ｍＬ，ａｎｄｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｙｒａｔｅｓｗｅｒｅ９９８７％ａｎｄ１００９２％ （ｎ＝６），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｉｔｃａｎｂｅｕｓｅｄａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｄｉｒｅｃｔａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅｍｅａｎｓｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅａｎｄＬｏｒｎｉｔｈｉｎｅ．Ｔｈｕｓ，ｉｔｐｌａｙｓａｎｉｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｒｏｌｅｉｎｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＬｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅｂｙｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；ｐｒｅｃｏｌｕｍｎｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ；Ｌｃｉｔｒｕｌｌｉｎｅ；Ｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ ［４］ ［５］ ［６］ ［７］ 　　Ｌ 鸟氨酸和Ｌ瓜氨酸作为尿素循环的中间代 法 、纸层析法 、酶法 和比色法 ．Ｌ 瓜氨酸的分 谢产物，对氨态氮的排出以及解除氨中毒有重要的 ［８］ ［９］ ［１０］