基础医学-生物化学-安徽医大精品课程生物化学第十一章 RNA的生物合成.PPTVIP

第 十 一 章;转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;转录与复制的相同点;复制和转录的区别 ;参与转录的物质;模板和酶 Templates and Enzymes;5′···GCAGUACAUGUC ···3′;DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链。 相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 ;5? 3?;二、RNA聚合酶 (RNA-pol);核心酶 (core enzyme);RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;?亚基;（二）真核生物的RNA聚合酶 ;三、模板上酶的辨认、结合;RNA聚合酶保护法;开始转录; TATA盒;;转录过程 The Process of Transcription;（一）转录起始;;2. DNA双链解开;（二）转录延长;;转录空泡(transcription bubble)：;;5?;依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;A T P;与RNA转录产物结合，使得Rho因子和RNA聚合酶都可发生构象变化，从而使RNA 聚合酶停顿，解螺旋酶活性使得DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放;2. 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ; 使RNA聚合酶变构，转录停顿； DNA和RNA各自形成自己的局部双链，使杂化链更加不稳定，以致转录复合物趋于解体。 接着的一串寡聚U，则更是促进RNA新链从模板上脱落的促进因素。;二、真核生物的转录起始;转录起始点;2. 转录因子 ;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ ;3. 转录起始前复合物 (pre-initiation complex, PIC) ;POL-Ⅱ;4. 拼板理论(piecing theory) ;（二）转录延长;RNA-Pol;（三）转录终止;5?------AAUAAA-;真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification;几种主要的修饰方式;一、真核生物mRNA的转录后加工;帽子结构;5? pppGp…;真核生物mRNA中poly A的出现是不依赖于DNA模板的。 加入poly A之前，先由核酸外切酶切去3’末端一些过剩的核苷酸，然后加入polyA。 3‘’端修饰也是在细胞核中，在剪接之前进行的。 Poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身的稳定性。;3’端修饰示意图;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;1. hnRNA 和 snRNA ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;3. 内含子的分类 ;4. mRNA的剪接;②;pG-OH (ppG-OH, pppG-OH);? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。;二、tRNA的转录后加工;RNAaseP、内切酶;tRNA核苷酸转移酶、连接酶;碱基修饰;丰富基因：染色体上一些相似或完全一样的纵列串联基因单位的重复。 真核细胞的rRNA基因属于丰富基因。 45s的转录产物是三种rRNA的前体，经过剪接后形成核糖体小亚基的18S rRNA，其余形成5.8S及28S的rRNA。;转录;四、核 酶;;四膜虫rRNA内含子的二级结构;最简单的核酶二级结构——槌头状结构 (hammerhead structure);核酶研究的意义