转Bt基因棉花根际细菌和古菌群落结构分析.PDF

第 44 卷 第 4 期 土 　壤 　学 　报 Vol44 ,No4 2007 年 7 月 ACTA PEDOLOGICA SINICA 　July ,2007 转 Bt 基因棉花根际细菌与古菌群落结构分析 1 2 1 唐 　黎 　张永军 　吴晓磊 ( 1 清华大学环境科学与工程系 ,环境模拟与污染控制国家重点实验室 ,北京 　100084) (2 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室 ,北京 　100094) ( ) 摘 　要 　　在一年内棉花的四个生长时期 苗期 , 蕾期 ,花铃期 , 吐絮期 分别采集转 B t 基因抗虫棉 GK12 和非转基因亲本棉花泗棉 3 号根际土壤 , 以及未种植棉花的背景土壤 ,利用末端标记限制性片段长度 ( ) 多态性 TRFLP 分析技术 ,分析三种土壤中细菌和古菌的 16S rRNA 基因片段多态性 ,结合克隆文库建立和 测序 ,研究了土壤中细菌和古菌群落结构的变化 。结果表明:在棉花生长的各个时期 ,背景土壤中细菌群落 结构发生了明显的变化 ,生物多样性指数明显降低 ,古菌群落结构也有一定的变化 ,说明季节性变化对土壤 中微生物群落产生了明显的影响 。与背景土壤相比 ,棉花种植后根际土壤中细菌和古菌群落发生显著的变 化 。转基因棉花与非转基因棉花相比 ,根际土壤细菌和古菌的种类和种群大小的分布也发生了明显的改变 。 克隆文库和测序结果表明土壤中主体微生物为 目前未培养的、功能特性未知的细菌和古菌 ,转基因棉花种植 对这些细菌和古菌影响的原因、环境危害和生态风险目前尚不清楚 。与古菌群落相比 ,棉花种植对细菌群落 结构的影响较小 。 ( ) 关键词 　　转基因棉花 ;微生物群落 ;末端标记限制性片段长度多态性 TRFLP ;生物安全 中图分类号 　　X172 　　　　　文献标识码 　　A 　　自1986 年第一例转基因植物进行田间试验以 物 。目前 ,对于包括转基因棉花在内的转基因植物 来 ,转基因植物技术研究发展迅速 。转基因植物在 生物风险评价一般都集中在地面以上 ,而地面以下 给农业生产带来极大效益的同时 ,其潜在的生态环 一般也只研究了针对线虫等真核生物的影响或是 境风险以及生物安全也引起了人们的关注 。其中 采用培养手段研究可培养细菌 ,而对于土壤中大量 与植物联系最密切的非靶标生物 ———土壤微生物 不可培养的微生物主体却少有研究 。传统的利用 因其结构群落的复杂性 ,研究尚不深入 ,所获得的 培养方式对微生物进行检测的方法最大的缺陷是 数据还不能得出统一结论 ,例如有研究表明 ,产木 无法准确地揭示环境 中微生物群落 的真实情况 。 质素过氧化酶和淀粉酶的转基因苜蓿根际微生物 随着分子生物学的发展 ,对微生物多样性的研究逐 细菌种类和底物利用都存在差异[ 1] ;转抗除草剂草 渐深入到 DNA 分子水平 , 主要是利用了基于分子 甘膦基因油菜的种植不会明显影响可培养的根际