超抗原的检测与发展前景.ppt

概念 超抗原(supemntigen，SAg)是一类具有多种免疫活性的蛋白分子，在一定条件下能比普通抗原十至数千倍激活T细胞和抗原呈递细胞。是一类具有刺激T细胞、B细胞活化的多克隆激活剂，主要为某些细菌或病毒的产物。 超抗原种类 超抗原 外源性超抗原 内源性超抗原 由细菌分泌的可溶性蛋白质，包括G+菌分泌的各种外毒素（如葡萄球菌的肠毒素）.  由感染哺乳动物细胞的某种病毒编码的细胞膜蛋白质（如小鼠乳腺瘤病毒3‘端LTR编码的抗原成分） 确定细菌来源：先确定所要研究的对象，准备样本与对照物，然后分离鉴定获得 ; 2. 细菌培养和模板提取：将样本接种在平板上并培养洗下菌苔，煮沸离心制备悬浮液调浓度备用并模板提取； 3.引物的设计：根据查阅资料设计多对引物分别扩; 4. PCR 经多次摸索，得出各PCR的最适条件：即变性或预变性，退火，延伸的温度和时间，然后用1%琼脂凝胶电泳并紫外线下观察; 5. ELISA（酶联免疫吸附测定）和RPLA ; 6. 结果分析。 作用机理 超抗原与疾病 被超抗原大量激活的T淋巴细胞会变得无活性甚至被清除，继而导致免疫缺陷。这种免疫缺陷可能是由于被激活的T淋巴细胞的TCR内在化引起的。超抗原激活的自身抗原特导T细胞是引起自身免疫病的主要原因。 激活T细胞的机制 超抗原与疾病 超抗原与多种感染性疾病有着直接或间接的关系。如MMTV、Rabies病毒、EBV病毒和结核杆菌等引起的感染均与超抗原作用有关。超抗原在MMTV的感染中起到关键作用。在该病毒感染中B细胞首先被激活。为MMTV提供了储存场所，然后进一步激活的T、B细胞为感染创了有利条件，病毒大量繁殖．产生丁一个稳定的病毒载体库。 MMTV病毒 食道结核杆菌 Rabies病毒 超抗原疫苗 为有效防治SAg的毒性效应，近年从SAg和TCR、MHC2作用的分子机制提出了超抗原疫苗。即诱变或修饰超抗原分子，降低其与MHC2类分子和TCRV β区的亲和力，使获得的突变体失去超抗原的毒性作用，但能刺激产生与天然超抗结合并具有保护作用的特异抗体。这类减毒分子可以作为有效的疫苗用于防治超抗原介导和引起的疾病。超抗原疫苗改变了对T细胞的刺激效应，消除、失活或脱敏一个或多个带有VB区的T细胞亚群，不再以超抗原而以普遍抗原的方式诱导对T、B细胞的刺激，并产生抗体 。