2018年几种高效薄层色谱法的原理汇总.docVIP

几种高效薄层色谱法的原理汇总 　　几种高效薄层色谱法的原理汇总 　　薄层色谱扫描仪是今年国家GMP认证重点关注的产品，从年初开始，薄层的询单客户就络绎不绝。薄层的火热主要来源于药典的变更。 　　2015版药典规定多种样品检测需要用到薄层色谱扫描仪，企业要通过GMP认证也必须有带审计追踪功能的薄层色谱扫描仪。目前市场上主流的 　　审计追踪薄层色谱扫描仪主要有KH2000，KH2100,KH3000，KH3500plus,KH3100等。 国达色谱公司专业提供GMP认证专用薄层色谱扫描仪。下面为大家介绍几种高效薄层色谱法的原理汇总: 　　摘要 : 薄层色谱，与其他色谱技术的原理一样，是一种利用样品中各组成成分的不同物理特性把它们分离开来的技术。这些物理特性包括分子的大小、形状、所带电荷、挥发性、溶解性及吸附性等。薄层色谱分离一般是由几种分离机理综合的结果，最多的是吸附和分配，也有离子交换或凝胶渗透。鉴于在薄层色谱的过程中，固定相和流动相的特性因分离原理的不同而差别较大，因此，为 　　薄层色谱，与其他色谱技术的原理一样，是一种利用样品中各组成成分的不同物理特性把它们分离开来的技术。这些物理特性包括分子的大小、形状、所带电荷、挥发性、溶解性及吸附性等。薄层色谱分离一般是由几种分离机理综合的结果，最多的是吸附和分配，也有离子交换或凝胶渗透。鉴于在薄层色谱的过程中，固定相和流动相的特性因分离原理的不同而差别较大，因此，为了方便叙述，现分别将各类型的色谱基本原理以及相关固定相和流动相的技术要求简要介绍如下。 　　第一节 吸附色谱 　　一、吸附色谱的原理 　　吸附色谱法溶解于一相中的混合物的单一组分在另一相界面上会呈现出浓度变化，另一相表面常常出现组分的浓缩，这种现象称之为吸附。吸附性薄层色谱法是将吸附剂在光洁的表面，如玻璃、金属或塑料等表面上均匀地铺成薄层，而后在上面点上样品，以流动相展开，这样，组分不断地被吸附剂吸附，又被流动相溶解，解吸而向前移动。由于吸附剂对不同组分有不同的吸附能力，流动相也有不同的解吸能力，与吸附剂结合较紧密的组分较难被展开剂解吸，而与吸附剂结合较松散的组分则较容易被展开剂解吸。因此在流动相向前流动的过程中，不同组分移动距离不同，原有的混合物就可以得到分离。分离度一般用比移值Rf值来表示，其数值可以通过被分离组分斑点中心离原点的距离与展开剂前沿离原点的距离之比计算出来。 二、吸附色谱中对固定相的要求 　　吸附色谱的固定相常称为吸附剂。目前最常用的吸附剂是硅胶和氧化铝，其次是聚酰胺、硅酸镁等，还有一些物质如氧化钙(镁)、氢氧化钙(镁)、硫酸钙(镁)、磷酸钙(镁)、淀粉、蔗糖等，但因碱性太大或吸附性太弱，致使用途有限;而活性炭的吸附性太强，本身又是黑色，故很少用于色谱分离。具体要求如下: 　　?具有大的表面积和足够的吸附能力; 　　?对不同的组分有不同的吸附性，因而能较好地分离不同的化学成分; 　　?在所用的溶剂和展开剂中不溶解; 　　?不破坏或分解供试品中各组分，不与供试品中溶剂和展开剂起化学反应; ?颗粒大小均匀，一般要求直径小于70u.m(小于250目)且在使用过程中不会碎裂; ?具有可逆的吸附性，既能吸附样品组分，又易于解吸附; 　　?为便于观察分离结果，最好是白色固体。 　　三、吸附色谱中对流动相的要求 　　流动相的选择必须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑。在用极性吸附剂进行色谱分离时，当被分离物质为弱极性物质时，一般选用弱极性溶剂为展开剂; 　　被分离物质为强极性成分时，则需选用极性溶剂为流动相。如果对某一极性物质使用吸附性较弱的吸附剂(如以硅藻土或滑石粉代替硅胶)，则流动相的极性亦必须相应降低。 在薄层色谱中，当吸附剂活度为一定值时(如?级或?级)，对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于展开剂的选择。而展开剂的选择原则主要还是根据被分离物质的极性选择相应极性的展开剂。 　　第二节 分配色谱 　　一、分配色谱的基本原理 　　分配色谱法是利用混合物的各个组分在两相溶剂中的分配系数不同而达到分离的一种色谱方法。但需将两相溶剂中的一相，设法固定在某一固体物质上。这样的固体物质，如硅藻土、纤维素粉等，常称为载体。被载体吸收的溶剂，称为固定相。第二相缓慢地在固定相表面上流动，故被称为流动相。然而，这两相必须是平衡以后相互饱和，否则将会在色谱分离过程中出现所用溶剂系统的浓度变化。在色谱过程中，当展开剂流经原点时，被测混合物中的不同物质即在两相之间进行分配，每展开一点距离，被分离物质都接连不断地重复地进行着分配。溶质在固定相中的物质的量浓度与其在流动相中的物质的量浓度之比常称为分配系数，分配系数小的物质，即在流动相中溶解得多的物质，随流动相移动的距离就较大，R