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第十一章 细胞增殖及调控 第一节 细胞周期与细胞分裂 一、细胞周期： 1.细胞增殖的意义： 细胞增殖 (proliferation)是细胞生命活动中的一个重要部分对于多细胞生物体的生长发育以及生物种群的延续都具有十分重要的意义，例如一个成年人约有1014个细胞构成，而如此多的细胞均来源一个受精卵，是通过大量的连续不断地细胞分裂增殖以及细胞分化才形成人体的，此外每个人体均每秒钟还要产生几十万个新细胞，来补偿体内各种细胞，维持机体细胞数量的相对平衡。 2.细胞周期的概念： 细胞增殖包括：细胞生长，DNA复制和细胞分裂三个主要事件，构成细胞周期。 可分为四个期：P359 G1期； S期； G2期； M期。 其中的S期是DNA合成期，M期是分裂期，而G1和G2分别是合成前期和合成后期，因为分裂期chr出现明显的形态特征，（通常从一次分裂中期到下一次分裂中期的历程称为一个周期）M期中又分为前期、中期、后期和末期四个阶段。 从细胞增殖行为来看，细胞在晚G1期开始分歧为三类： ①周期性细胞即持续在周期中运转的细胞。 ②Go期细胞（休眠细胞）即暂时脱离周期，但在适当的刺激下仍可恢复进入周期的细胞。P360 ③终端分化细胞（特化细胞）即不可逆地脱离细胞周期，丧失分裂能力，但保持生理机能活动的细胞。 3.细胞周期的速率： 细胞周期时间（Te）是随细胞类型不同而异，周期内四个期的时间亦各不相同，一般规律是： ①S期长、M期短； ②G1时间（tG1）易变，但tG2，tS和tM都变化不大；③tG1长短是细胞周期速率变化的基础。 4.细胞周期各时相的时间确定： · 仅M期可依据chr形态变化来判断，其它三期无形态判断依据。 · 3H-TdR脉冲标记和放射自显影观测： 标记物渗入仅S期细胞，最先在M期出次的标记细胞是被标记的S期最晚期细胞。 细胞周期同步化的人工制备： 生物界有种天然细胞群体呈现自然同步化现象，但一般的体外培养细胞群体皆呈现为非同步化现象，因此细胞生物学研究常需要人工同步化的实验材料。 · M期细胞选择收集法 · 过量TdR双阻断法，（DNA合成抑制剂）此法适用于tG＋G2＋（M）tS的细胞类型 · 分裂中期阻断法 5.细胞周期时相及主要事件： （1）细胞周期检验点： 细胞周期沿G1—S—G2—M有序地进行，是与细胞分裂周期有关基因cdc的有序表达结果，而cdc基因的表达效应是受周期中一些检验点（or 称调控点）监控的，以保持严格有序，精确的运转，而不正常的细胞会被阻止在检验点阶段，常说的有G1/ S转换点，G2/M检验点和中期后期转换点等这种特异的监控机构可鉴别细胞周期进程中的错误，并诱导产生特异的抑制因子，阻止细胞周期进一步运行，若这些检验点功能失控，其后果是细胞癌变or 细胞 die。 （2）细胞周期各阶段的主要生化活动： 1）G1期：此期细胞内代谢活跃，细胞生长，体积增大，主要进行RNA和蛋白质的合成（重要蛋白质包括：G1周期蛋白质，钙调素及有关DNA合成的酶系等）若G1期的蛋白质及RNA合成受阻，则细胞不能进入S期。 2）S期：此期细胞内主要生化事件是DNA合成复制，其次还有组蛋白质，非组蛋白质和RNA的合成，并伴随有核小体结构复制，有三个特点： ①四种脱氧核苷酸合成速度不均一，S期初期C-G含量高，前后期A-T含量高。 ②ch质复制早晚不同，常ch在S期前半期复制，而异ch质在后半期复制。 ③DNA合成和组蛋白质合成紧密相联，例如：用放线菌酮抑制组蛋白质合成，则DNA合成也马上停止，反之若用羟基尿来阻断DNA合成，组蛋白质也随即停止合成。 3）G2期：此期细胞生化活动是为M期的细胞分裂作准备，主要是活跃地合成G2蛋白质，微管蛋白质（形成纺锤丝base），RNA及ATP，这些都是通过G2/M检验点所必需的。 4）M期分裂之中，细胞内生化合成活动都减弱，如RNA合成停止，蛋白质合成减少，此期仍有少量非组蛋白质合成。 二、有丝分裂： （一）前期 主要事件：染色质凝缩，分裂极的确定，核仁解体和核膜消失。 1）分裂极的确定： 纺锤极决定细胞分裂的方向，而其确定与中心粒活动相关，每个中心体由2个相互垂直排列的中心粒构成，在S期，每个中心粒端部外侧新生一个短的中心粒，与老中心粒垂直分布，到前期，两对中心粒分别移向相对两极，有关中心粒自我装配，生长和转移是周期性规律。 2