茶树花粉特异蛋白基因CsPSP的反义载体构建.PDFVIP

安徽农业大学学报, 2012, 39(3): 397-400 Journal of Anhui Agricultural University 网络出版时间：2012-4-28 8:08 [URL] /kcms/detail/34.1162.S0808.011.html 茶树花粉特异蛋白基因 CsPSP 的反义载体构建 1 2* 1 2 2 2 2 龚 莹 ，余 梅 ，江昌俊 ，吴 凡 ，吉 虎 ，徐 凯 ，臧 洁 (1. 安徽农业大学教育部和农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室，合肥 230036 ； 2. 安徽农业大学生命科学学院，合肥 230036) 摘 要：以茶树龙井43 品种的后期花蕾为试验材料，提取总 RNA ，然后进行RT-PCR 得到 cDNA 第 1 链。同 时，根据 GenBank 上登录的茶树花粉特异蛋白基因 CsPSP （DQ887753 ）的序列，设计1 对特异引物进行 PCR 反 应。将扩增后的基因片段插入 pBI121 表达载体中，并测序。结果表明，插入 pBI121 载体的片段长度为 318 bp ，与 已知序列进行比对后一致性达到99.02% ，说明载体构建成功。 关键词：茶树；CsPSP；反义载体 中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：1672−352X (2012)03−0397−04 Antisense vector construction of CsPSP pollen specific protein gene from tea plant (Camellia sinensis L.) 1 2 1 2 2 2 2 GONG Ying , YU Mei , JIANG Chang-jun , WU Fan , JI Hu , XU Kai , ZANG Jie (1. Key Laboratory of Tea Biochemistry and Biotechnology, Ministry of Education and Agriculture, Anhui Agricultural University, Hefei 230036; 2. School of Life Sciences, Anhui Agricultural University, Hefei 230036) Abstract: In order to study the expression of the pollen-specific gene in tea plant, a pair of specific primers with double enzyme sites was designed to clone a cDNA fragment of CsPSP gene from Longjing43 by the method of RT-PCR, and then the CsPSP fragment was ligated with pBI121 vector and sequenced. The result indicates that the sequence has 99.02% similarity to CsPSP gene in GenBank. Key words: Camellia sinensis.; CsPSP; antisense vector 茶树（Camellia sinensis）是山茶科山茶属，多 花粉的萌发及花粉管伸长有关[7] 。 年生常绿木本植物。目前对于茶树的生殖生长的调 2008 年，余梅等[8]分离并克隆出茶树花粉特异 控主要集中在合理