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实验诊断学实验指导 兰州大学第一医院实验诊断教研室 实习的目的与要求： 一、实习目的 通过实习学习有关检验的操作方法，熟悉和了解其基本技术，以便进一步理解课堂讲授的内容，达到理论联系实际的目的。 二、实验室守则 1、准时参加实习，进实验室时必须穿好白大衣，遵守课堂纪律注意保持实验室的整齐与安静。 2、实验前，将学习手册加以预习。实习开始，仔细听取讲解，认真观察示范操作及示教标本，先明了实验原理和操作步骤后再操作。 3、实验过程中要认真操作，仔细观察并联系有关理论进行思考，注意检验数据的准确性和严谨性。 4、爱护仪器，节约试剂，用前检查，用后清点，损坏时要登记赔偿。 5、注意安全，凡病人标本均应视为有传染性，应防止污染自己及他人每次实习课后认真洗刷实验用具，并轮流搞好实验室的清洁卫生。 6、认真作好实验记录，正确地书写实验报告并于每次实习后交给辅导教师。实验成绩共20分（每次实验3分，提问2分），直接加到期末考试成绩中（卷面成绩满分80分）。 目 录 第一单元 血液一般检查……………………………………… 第二单元 尿及粪便常规检查…………………………………… 第三单元 浆膜腔穿刺液与脊髓液检查…………………………. 第四单元 检验报告单的阅读及分析……………………………. 第一单元 血液一般检查 一、红细胞计数(red blood cell count) [要求] 掌握末梢采血技术，熟悉细胞计数板的结构及用法，进行红细胞计数，并记住参考值、临床意义。 [原理] 一定量的血液，经一定量的等渗性溶液稀释后，充入血细胞计数室中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞，并求得每升血液内的红细胞数。 ． [仪器试剂] 1、血细胞计数板，为一特制的长方形硬质玻璃板，中间l／3部分具有“H”形槽沟，横槽沟上下的平台部分各深0.1mm，成为二个计数台(池)，每台有一个计数区域，分为9个大方格，每一个大方格的面积为lmm2，四角的每个大方格又划分为16个中方格，供白细胞计数用。中央的一个大方格用双线划分为25个中方格，每中方格又划分为16个小方格，共为400个小方格，供红细胞计数用。计数台之上覆以特制的盖片(厚度0.4mm、表面平直、质地较硬)后构成计数室。每个大方格的体格是0.1mm3(1mm×lmm ×0.1mm)，参阅图1，2及3。 2、容量准确的微量吸管(具有10ul及20ul刻度) 3、红细胞稀释液(Hayem稀释液) 氯化钠 1.0ɡ 硫酸钠 (Na2S04·10H20) 5.0ɡ 氯化高汞 5.0ɡ 蒸馏水加至200ml过滤后备用 此稀释液为等渗性溶液，比重较大，使红细胞易于悬浮，并有防腐作用。 4、光学显微微 5、消毒、穿刺用具为75％酒精棉球、干棉球、消毒刺血针。 [方法] 1、准确加红细胞稀释2m1于一中号试管中，塞紧管口，并拭净血细胞计数板及盖玻片。 2、用75％酒精棉球消毒被检人左手无名指尖侧腹部。 3、待酒精挥发后．由左手捏紧取血部位，以右手持消毒穿刺针快速速人约2~3mm深。拭去第一滴血后，用微量吸管准确吸血到l0ul处，拭去管尖外余血，将吸管插到稀释液中迅速地把血液放出，并用上清液洗净吸管内残存血液，立即轻轻振荡混匀，用消毒干棉球按压穿刺伤口。 4、进一步混匀红细胞悬液，然后用尖吸管吸取数滴 (或用细玻璃棒醮取一滴，充入计数室内准备计数。充细胞悬液时应防止产生气泡，要一次充好，液量多少适宜。水平位静置2~3min待细胞沉下。 5、用低倍镜找出红细胞计数区域。计数中央大方格中的四个角和中心的五个中方格内的红细胞。凡在中方格双线上的红细胞按压左侧及上侧线者计入。 6、将5个中方格内红细胞数×5×10×200×106=5个中方内红细胞数×1010=红细胞数／L，报告方式：Δ、ΔΔ×1012/L上式中 ×5表示把5个中方格内红细胞数折算为1个大方格的红细胞。 ×10表示把1个大方格容积 (0．1u1) 折算为lul。 ×200表血液稀释倍数。 ×106表示将ul换算为L。 Δ、ΔΔ×1012表示将红细胞数以小数点前保留1位数字乘以1012 形式报告。如数得红细胞为450个则报告为4.5×1012／L。 [注意事项] 1、取血部位的皮肤必须正常， 2、一人一针，防止交叉感染。 3、微量吸管的容量必须准确，内腔一定要干燥， 4、取血动作