正相和反相柱层析组合分离纯化紫杉醇-微生物学报-中国科学院.PDF

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$$ ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$$ - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 正相和反相柱层析组合分离纯化紫杉醇 ! # 张志强 苏志国 ! # （大连理工大学生化工程研究所 大连 ） （中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室 北京 ） !!$!# !$$$1$ 摘 要 采用正相氧化铝柱层析和反相 柱层析从东北红豆杉培养细胞浸提物中分离纯化了紫杉醇。优化了氧 5 !1 化铝柱层析和反相柱层析的操作条件。实验发现，经过氧化铝柱层析后，测得的紫杉醇量大大增加。经两步层析， 使紫杉醇的含量从小于!6$7提高到087，样品中微量杂质继以重结晶步骤除去，即可获得纯度超过017的紫杉 醇晶体。采用!4 对晶体分析，所得产物结构与文献上紫杉醇的结构一致。 5)9: 关键词 紫杉醇，正相柱层析，分离纯化 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） ;1!46! !$$$24$!#$$$$!2$$02$8 从红豆杉树中分离出的紫杉醇（ ）是近 化学品有限公司生产。分子筛（ ）购于北京化学 =+’ #$ ? ［］ ! 年来发现的最有效的天然抗癌药物 ，因紫杉醇的 试剂公司。 抗癌作用独特，几年来引起了世界各国的重视。最 !!# 仪器：JB238$@AB5仪为KL5M9) 公司 初，紫杉醇是从天然红豆杉树皮中提取分离得到的， 产品。NO2 旋转蒸发器为北京科龙仪器公司产 其在树皮中的含量平均为万分之一点五，提取所得 品。 常压层析系统为 公司产品。 = I5 AG+.F+QD+ /P ［］ 到的实际上平均为万分之一# 。为解决紫杉醇有 !# 实验方法 限的药源及防止天然红豆杉树的乱砍乱伐问题，一 !#! 紫杉醇粗品的制备：收集东北红豆杉培养 方面，国内外学者围绕红豆杉植物的栽培、紫杉醇的 细胞，室温下每克干细胞用 甲醇浸泡 ，过 !$$FB #R 化学合成、红豆杉的组织和细胞培养进行了有益的 滤，取滤液用旋转蒸发器在?$!8$S 蒸发，回收甲 ［，］ 探索4? ；另一方面，研究高效、经济的提取分离方