不同材料对兔气管吻合口愈合质量影响的实验分析.doc

不同材料对兔气管吻合口愈合质量影响的实验研究 前 言 随着外科技术的进展，临床行气管及支气管重建以及肺移植的手术变得越来 越多见，特别对气管肿瘤及中央型肺癌的外科治疗而言，气管及支气管袖状成形 术可更大限度的保留正常肺组织，改善患者的生存质量 ［1,2］。然而部分患者可于 术后发生吻合口瘘和远期吻合口瘢痕狭窄，导致再手术。各种研究表明：气管及 支气管缝合材料的选用对吻合口愈合质量可产生不同的影响[3,4]。目前，国内通 常采用丝线、涤纶线和人工合成吸收缝线作为缝合材料，但其对吻合口质量的影 响，以及关于这三种缝合材料之间在气管切开吻合中细节比较，尚未见报道。 本论文拟分别采用丝线，涤沦线和人工合成吸收缝线作为缝合材料，通过动 物实验，进行兔气管端端吻合术，在不同时间段，提取采用三种不同缝合材料进 行吻合的三组实验兔气管的吻合口标本，进行对比，比较标本的大体形态，吻合 口通畅程度，气管吻合口内径；以及在光学显微镜下对吻合口的愈合情况进行观 察，比较吻合口炎症细胞浸润；并采用免疫组化 SABC 方法测定转化生长因子 β1（Transforming Growth Factor-beta 1 ,TGF－β1）的表达。最后，对以上各组 实验数据进行统计学分析，从而为临床应用上提高气管、支气管重建的成功率和 减少气管吻合口瘢痕狭窄提供实验依据。 1 材料与方法 1 实验动物： 南华大学动物实验部提供健康成年新西兰大白兔 36 只，体重 1.6－2.0 公斤， 雌雄不限，将实验兔随机编号，并做标记，按照不同的缝合材料随机分为三组： 丝线组、涤纶线组和人工合成吸收缝线组，每组 12 只。 2 实验试剂： 1 缝合材料： 2．1．1 丝线组：由杭州富阳医用缝合针线厂制造，规格为0号（，生产许号）。 2．1．2 涤纶线组：由杭州华威医疗用品有限公司生产，规格为（3－0），（生产 许可 2650255 号）。 2．1．3 人工合成吸收缝线组： 单乔 Monocryl（Poliglecaprone 25）缝线，爱惜 康公司制造，规格为（3－0），（国药管械(进)2001 第 3650120 号）。 2 麻醉药品：速眠新Ⅱ注射液 由长春军需大学兽医研究所试制。吉兽药试 字（2002005004）。规格为 1.5ml/支。 3 抗感染药品：青霉素，规格 80 万单位/支。 4 TGF - β1 免疫组化试剂盒 ：由武汉博士德生物工程有限公司提供。 5 即用型 SABC免疫组化染色试剂盒：由武汉博士德生物工程有限公司提 供。 3 实验仪器及设备 仪器设备名称 型号 产地 生物组织自动脱水机 ZT-12K 湖北孝感亚光医用电子技 术研究所 生物组织石蜡包埋机 YB-6D 常州中威电子仪器厂 病理组织漂烘处理仪 PHY-Ⅲ型 常州中威电子仪器厂 2 石蜡切片机 SHANDON AS325 英国 显微镜 OLYMPUS CX41 日本 BLTDMC-2080 超解晰度病理图文分析系统 海尔冰箱 BCD-162A 电滋炉 高压锅 4 实验方法和步骤： 1 动物实验： 1. 1 实验动物： 南华大学动物实验部提供健康成年新西兰大白兔 36 只，体重 1.6-2.0 公斤， 雌雄不限，将实验兔按照随机数字表进行编号，并做好标记，根据缝合材料的不 同随机分为三组：丝线组、涤纶线组和人工合成吸收缝线组，每组各 12 只，以 上三组再随机分为 1 周、2 周、4 周组（各组四只）。 1. 2 麻醉方法： 每只动物在术前给予速眠新Ⅱ注射液（0.1ml/Kg）肌肉注射，必要时于手术 中追加药量。 1. 3 手术过程： 将麻醉后的实验兔后仰位固定于手术台上，颈部皮肤备皮，剃毛。常规碘酒， 酒精消毒术野皮肤，铺无菌巾，取颈部正中切口约 5cm 逐层切开，暴露气管， 于甲状软骨下第二三气管环切开气管周径的一半，测量管径的大小并记录，待与 术后比较。普通 0 号丝线间断缝合两断端，控制针距 2-3mm，边距 2-3mm，每 根缝线打三个单结，再次稀释碘伏消毒气管，止血，逐层缝合手术切口。分别取 另两种缝合材料涤纶线和人工合成吸收缝线采用同法缝合另两组实验兔气管。所 有操作都由同一位外科医生完成。 2 术后治疗： 三组实验动物术后麻醉清醒后即恢复饮食。术后肌肉注射青霉素 20 万μ，每 天一次，共三天，预防感染。术后三组实验兔均恢复顺利，无死亡。 5 观察、取材及测试： 1 肉眼观察： 3 术后 1 周、2 周、4 周后，在速眠新Ⅱ注射液麻醉下经原切口暴露实验兔气 管，肉眼观察吻合口愈合情况及周围粘连情况。 2 取材： 将三种缝合材料组中不同时间段组的实验兔气管标本取出后，在距吻合口两 侧各约 0.5cm 处切断气管，取此吻合口段气管标本测量吻